Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 13
1.1. Фагоцитоз как клеточно-биологический феномен 13
1.2. Нуклеотидные Р2Х7 рецепторы 27
1.3. С038/НАД+-гликогидролаза 36
ГЛАВА 2. Материал и методы исследования 48
2.1. Моделирование перитонита 50
2.2. Осмотр животных 51
2.3. Морфологическая оценка биоптатов брюшины 51
2.4. Выделение перитонеальных макрофагов 52
2.5. Идентификация и жизнеспособность макрофагов 52
2.6. Регистрация блеббинга плазматической мембраны 54
2.7. Детекция клеток, экспрессирующих Р2Х7 рецепторы 54
2.8. Регистрация экспрессии CD38 55
2.9. Определение АДФ-рибозилциклазной активности CD38 56
2.9.1. Определение содержания белка 56
2.9.2. Флуориметрический анализ АДФ-рибозилциклазной активности 57
2.10. Определение функциональной активности макрофагов 57
2.10.1. НСТ-тест 57
2.10.2. Спектрофлуориметрическая оценка функциональной активности макрофагов 58
2.11. Идентификация апоптотических макрофагов 60
2.11.1. Оценка апоптоза макрофагов методом TUN EL 60
2.11.2. Детекция апоптоза макрофагов методом Annexin V 60
2.12. Статистическая обработка результатов 61
ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований 63
3.1. Осмотр животных 63
3.2. Морфологическая оценка брюшины 66
3.3. Идентификация и жизнеспособность макрофагов 67
3.4. Блеббинг макрофагальной мембраны 69
3.5. Экспрессия Р2Х7 рецепторов и CD38 на перитонеальных макрофагах мышей 70
3.6. Активность АДФ-рибозилциклазы перитонеальных макрофагов мышей 72
3.7. Спонтанная и индуцированная активность макрофагов 73
3.8. Функциональная активность макрофагов 77
3.9. Апоптоз макрофагов 79
ЗЛО. Влияние FasL на функциональную активность и апоптоз макрофагов..84
3.11. Модуляция функциональной активности макрофагов 86
3.11.1. Воздействие через пуринергическую систему 86
3.11.2. Воздействие через систему пурин-изменяемых эктоферментов (CD38) 90
3.11.3. Воздействие через систему регуляции внутриклеточного кальция (рианодиновые рецепторы) 93
3.11.4. Воздействие через внутриклеточные флавопротеины 94
3.11.5. Сочетанное влияние модуляторов пуринергической, сопряженных с ней систем и индуктора апоптоза на функциональную активность
макрофагов мышей 95
ГЛАВА 4. Обсуждение полученных результатов 101
Выводы 127
Практические рекомендации 128
Список литературы 129
