Введение
Глава 1. Генетические и иммунологические аспекты патогенеза псориаза (обзор литературы) 17
1.1. Общие сведения о псориазе 17
1.2. Гены предрасположенности псориаза 18
1.2.1. Роль апоптоза в патогенезе псориаза 25
1.2.2. Регуляция программируемой клеточной гибели 26
1.2.2.1. Рецепторы семейства фактора некроза опухолей 28
1.2.2.2. Семейство цистеиновых протеаз 30
1.2.2.3. Семейство белков Вс1-2 31
1.2.2.4. Другие участники апоптоза 32
1.2.3. Полиморфизм гена IL12B 34
1.2.4. Полиморфизм гена TRAF3IP2 36
1.3. Современные представления об иммунных механизмах развития псориаза 38
1.3.1. Роль Т-лимфоцитов в патогенезе псориаза 39
1.3.1.1. Т-хелперы 1 типа 40
1.3.1.2. Т-хелперы 17 типа 41
1.3.1.3. Т-регуляторные лимфоциты 44
1.3.1.4. Т-клетки памяти 48
1.3.2. Роль дендритных клеток в патогенезе псориаза 50
1.3.3. Участие лимфоиднои ткани, ассоциированной с кожей, в патогенезе псориаза 53
1.4. Резюме 57
Глава 2. Материалы и методы исследования 59
2.1. Общая характеристика больных 59
2.2. Оценка частоты генных полиморфизмов в группах больных псориазом и здоровых доноров 63
2.2.1. Выделение ДНК из лейкоцитов 63
2.2.2. Генотипирование 64
2.2.2.1. Выбор генов-кандидатов и генных полиморфизмов 65
2.2.2.1.1. Полиморфные гены программируемой клеточной гибели 65
2.2.2.1.2. Полиморфные гены цитокина IL12B и адаптера Тп17-лимфоцитов -TRAF3IP2 67
2.2.2.2. Аллель-специфическая ПЦР в режиме «реального времени» 68
2.2.2.3. Контроль результатов ПЦР-амплификации 75
2.2.2.4. Рестрикционный метод ПНР 76
2.3. Анализ уровня экспрессии мРНК генов в коже 77
2.3.1. Проведение биопсии кожи 77
2.3.2. Выделение мРНК из срезов кожи 77
2.3.3. Определение экспрессии мРНК генов в коже 78
2.4. Определение содержания Т-регуляторных клеток в периферической крови 80
2.5. Микроскопическое исследование кожи 82
2.5.1. Гистологическое исследование 83
2.5.2. Непрямой иммуногистохимический метод исследования 83
2.6. Статистический анализ 86
Глава 3. Результаты генотипирования образцов ДНК 92
3.1. Анализ распределения генотипов и аллелей полиморфных генов программируемой клеточной гибели 92
3.1.1. Ген DR4Glu228Ala (А228С) 93
3.1.2. reHDR4Lys441Arg (A441G) 98
3.1.3. reHCaspl0Ile479Leu(A479T) 105
3.1.4. Ген p53Arg72Pro (G72C) 110
3.1.5. Генные полиморфизмы, которые были исключены из исследования 120
3.1.6. Генные полиморфизмы, которые не были обнаружены в исследованных выборках 121
3.1.7. Полиморфные гены апоптоза, у которых не обнаружена ассоциация с предрасположенностью к псориазу 122
3.2. reHlL12BA/Trsl2188300 129
3.3. Ген TRAF3IP2 Trp74Arg (A74G) 135
3.4. Резюме 140
Глава 4. Определение уровня экспрессии мРНК генов в коже больных псориазом и здоровых людей 143
4.1. ГенГЮХРЗ 143
4.2. TeHTNFa 146
4.3. reHTRAF3IP2 150
4.4. TeHlL17RA 153
4.5. Резюме 156
Глава 5. Определение количества Т-регуляторных лимфоцитов в периферической крови 158
5.1. Относительное и абсолютное содержание Т-регуляторных клеток в периферической крови 158
5.2. Резюме 164
Глава 6. Морфологическое исследование кожи больных псориазом и здоровых лиц 169
6.1. Гистологическое исследование срезов кожи 169
6.2. Иммуногистохимическое исследование срезов кожи 173
6.2.1. Результаты иммуногистохимического исследования кожи с маркерами В-лимфоцитов 174
6.2.1.1. СЭ20+-клетки 174
6.2.1.2. СБ79а+-клетки 176
6.2.1.3. Рах5+-клетки 178
6.2.2. Результаты иммуногистохимического исследования кожи с маркерами Т-лимфоцитов 181
6.2.2.1. СОЗ+-клетки 181
6.2.2.2. СБ4+-клетки 184
6.2.2.3. СБ8+-клетки 187
6.2.2.4. CD45RA+-miensH 191
6.2.2.5. CD45RO+-ioieTKH 194
6.2.2.6. ІІЛ7А+-клетки 197
6.2.2.7. FOXP3+-ioieTKH 200
6.2.3. Результаты иммуногистохимического исследования кожи с маркерами дендритных клеток 203
6.2.3.1. СБ1а+-клетки 203
6.2.3.2. CD207/Langerin+-ioieTKH 207
6.2.3.3. С011с+-клетки 210
6.2.3.4. СВ83+-клетки 214
6.2.3.5. СВ23+-клетки 219
6.2.4. Результаты иммуногистохимического исследования кожи с маркерами пролиферации и ингибиторов апоптоза 221
6.2.4.1. Кі67+-клетки 221
6.2.4.2. «Двойные позитивные» СОЗє+-Кі67+-клетки 224
6.2.4.3. Вс1-2+-клетки 227
6.2.4.4. Вс1-6+-клетки 230
6.2.5. Иммуногистохимические параметры кожи больных псориазом с различными генотипами гюлиморфных генов 233
6.3. Резюме 236
Заключение 243
Выводы 253
Практические рекомендации 256
Список литературы 258
