Введение
Глава 1. Обзор литературы 11
1.1. Механизмы устойчивости растений к фитофагам 11
1.1.1 Феномен устойчивости растений к фитофагам 11
1.1.2 Биохимические основы индуцированных защитных реакций растений в ответ на повреждение фитофагами 21
1.2 Участие про-/антиоксидантной системы в защите растений от фитофагов 25
1.3 Фитогормоны в системной индуцированной устойчивости растений к фитофагам 33
1.4 Роль бактерий рода Bacillus в индукции устойчивости растений к фитофагам 43
Глава 2. Материалы и методы 49
2.1 Объекты исследований 49
2.2. Условия проведения экспериментов 51
2.3 Методы изучения типов устойчивости к тлям 51
2.3.1 Тест на антибиоз 51
2.3.2 Тест на афицидность штаммов 52
2.3.3 Тест на выносливость растений 52
2.4 Методы гистохимических исследований 53
2.4.1 Локализация Н2О2 с помощью ДАБ 53
2.4.2 Локализация оксалатоксидазы 53
2.4.3 Выявление автофлуоресценции лигнина 54
2.4.4. Выявление фенольных соединений 54
2.5 Биохимические методы исследований 54
2.5.1 Получение белковых экстрактов 54
2.5.2 Определение активности оксидоредуктаз 55
2.5.3 Изоэлектрофокусирование 56
2.5.4 Измерение уровня пероксида водорода 57
2.5.5 Измерение активности ингибиторов протеиназ 57
2.6 Молекулярно-биологические методы 58
2.6.1 Выделение и очистка РНК из растений 58
2.6.2 Реакция от-ПЦР и полуколичественный анализ экспрессии гена 59
2.6.3 Полимеразная цепная реакция ДНК 60
2.6.4 Электрофорез РНК в полиакриламидном геле 60
2.6.5 Компьютерный анализ нуклеотидных последовательностей 61
2.7 Статистическая обработка результатов 61
3. Результаты и их обсуждение 62
3.1 Устойчивость различных видов пшеницы к обыкновенной злаковой тле Schizaphis graminum Rond. 62
3.2 Роль изопероксидаз растений в становлении устойчивости пшеницы к обыкновенной злаковой тле Schizaphis graminum 71
3.3 Бактерии рода Bacillus в регуляции устойчивости пшеницы к обыкновенной злаковой тле Schizaphis graminum Rond. 75
3.4 Влияние бактерий Bacillus spp. на образование фенольных соединений и лигнина при развитии устойчивости мягкой яровой пшеницы к обыкновенной злаковой тле Schizaphis graminum 86
3.5 Роль СК- и ЖК-зависимых сигнальных путей в развитии устойчивости растений пшеницы к обыкновенной злаковой тле S.graminum, индуцированной бактериями Bacillus spp. 89
3.6 Рекомбинантный штамм Bacillus subtilis 26ДCryChS с инсектицидной активностью 95
Заключение 102
Выводы 105
Список литературы 107
