Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 12
1. Понятие о циркадных ритмах. Роль и механизмы циркадных ритмов 12
1.1. Общая характеристика циркадных ритмов 12
1.2. Физиологические и биохимические механизмы регуляции циркадных ритмов ... 14
1.3. Молекулярно-генетические механизмы генерации циркадных ритмов 19
2. Роль циркадных генов в развитии патологических состояний организма 29
2.1. Ассоциация полиморфных маркеров циркадных генов с заболеваниями 29
2.2. Биохимические механизмы взаимосвязи циркадных генов и патологических процессов 32
3. Циркадные гены и сердечно-сосудистые патологии 35
3.1. Циркадные гены сердечно-сосудистой системы. Связь физиологических функций органов сердечно-сосудистой системы с циркадными ритмами 35
3.2. Механизмы влияния циркадных генов на развитие сердечно-сосудистых
патологий 39
ГЛАВА 2. Материал и методы исследования 46
1. Материал для исследования. Характеристика исследуемых групп доноров 46
2. Генотипирование 47
3. Определение уровня транскриптов генов 49
4. Иммуноферментный анализ 52
4.1. Количественное определение мелатонина в плазме крови 52
4.2.Количественное определение адренокортикотропного гормона в плазме крови... 53
4.3. Количественное определение кортизола в плазме крови 54
4.4. Количественное определение альдостерона в плазме крови 55
4.5. Количественное определение ангиотензинпревращающего фермента в плазме крови 56
4.6. Количественное определение тестостерона в плазме крови 57
4.7. Количественное определение ингибитора активатора плазминогена первого
типа в плазме крови 57
5. Определение липидного состава плазмы крови 58
5.1. Количественное определение общего холестерина 59
5.2. Количественное определение триглицеридов 59
5.3. Количественное определение холестерина липопротеинов высокой плотности... 60
5.4. Количественное определение холестерина липопротеинов низкой плотности 61
6. Статистическая обработка данных
ГЛАВА 3. Результаты исследования 63
1. Ассоциация полиморфных маркеров генов CLOCK и BMAL1 с риском развития ЭАГиИБС 63
1.1. Распределение частот аллелей и генотипов по полиморфным маркерам генов CLOCK и BMAL1 в контрольной группе и у пациентов, страдающих ЭАГ и ИБС 63
1.2. Связь полиморфных маркеров генов CLOCK и BMAL1 с риском развития ЭАГ и ИБС 70
2. Уровень транскриптов генов CLOCK, BMAL1 и PER1 в клетках буккального эпителия доноров контрольной группы и пациентов с диагнозом ЭАГ в зависимости от вариантов генов СЕОСКи BMAL1 72
2.1. Уровень транскриптов генов CLOCK, BMAL1 и PER1 в клетках буккального эпителия доноров контрольной группы и пациентов с диагнозом ЭАГ 72
2.2. Уровень транскриптов генов CLOCK, BMAL1 и PER1 в клетках буккального эпителия доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCK и BMAL1 74
2.3. Уровень транскриптов генов CLOCK, BMAL1 и PER1 в клетках буккального эпителия пациентов с диагнозом ЭАГ в зависимости от вариантов генов CLOCK и BMAL1 3. Содержание мелатонина в плазме крови больных ЭАГ и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCKnBMALl 86
4. Содержание адренокортикотропного гормона в плазме крови больных ЭАГ и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCKTABMALI 89
5. Содержание кортизола в плазме крови больных ЭАГ и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCK и BMAL1 92
6. Содержание альдостерона в плазме крови больных ЭАГ и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCKHBMALI 96
7. Содержание ангиотензинпревращающего фермента в плазме крови больных ЭАГ и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCK и BMAL1 98
8. Содержание тестостерона в плазме крови мужчин в группе больных ЭАГ и в контрольной группе в зависимости от вариантов генов CLOCK и BMAL1 100
9. Содержание ингибитора активатора плазминогена первого типа в плазме крови и уровень транскриптов гена PAI-1 в клетках буккального эпителия доноров контрольной группы и пациентов с диагнозом ЭАГ в зависимости от вариантов генов CLOCKHBMALI 101
10. Липидный состав плазмы крови больных ЭАГ и ИБС и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCK я BMAL1 107
ГЛАВА 4. Обсуждение результатов 115
1. Распределение частот аллелей и генотипов по полиморфным маркерам генов CLOCK и BMAL1 в контрольной группе и у пациентов, страдающих ЭАГ и ИБС. Связь полиморфных маркеров генов CLOCK и BMAL1 с риском развития ЭАГ и ИБС. 115
2. Уровень транскриптов генов CLOCK, BMAL1 и PER1 в клетках буккального эпителия доноров контрольной группы и пациентов с диагнозом ЭАГ в зависимости от вариантов генов CLOCK и BMAL1 119
3. Биохимические показатели плазмы крови доноров контрольной группы и пациентов с диагнозами ЭАГ и ИБС в зависимости от вариантов генов CLOCK и BMAL1 128
3.1. Содержание мелатонина в плазме крови больных ЭАГ и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCKnBMALl 128
3.2. Содержание адренокортикотропного гормона в плазме крови больных ЭАГ и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCK и BMAL1 131
3.3. Содержание кортизола в плазме крови больных ЭАГ и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCK и BMAL1 134
3.4. Содержание альдостерона в плазме крови больных ЭАГ и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCKaBMALl 138
3.5. Содержание ангиотензинпревращающего фермента в плазме крови больных ЭАГ и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCK и BMAL1 141
3.6. Содержание тестостерона в плазме крови мужчин в группе больных ЭАГ и в контрольной группе в зависимости от вариантов генов CLOCKnBMALl 142
3.7. Содержание ингибитора активатора плазминогена первого типа в плазме крови и уровень транскриптов гена PAI-1 в клетках буккального эпителия доноров контрольной группы и пациентов с диагнозом ЭАГ в зависимости от вариантов генов CLOCKH BMAL1 146
3.8. Липидный состав плазмы крови больных ЭАГ и ИБС и доноров контрольной группы в зависимости от вариантов генов CLOCKH BMAL1 154
Заключение 163
Выводы 170
Перечень сокращений и условных обозначений 171
Список литературы
