Введение
ГЛАВА 1. Литературный обзор 8
1.1. Биологическая характеристика и хозяйственная значимость объектов исследования
1.2. Современные методы сохранения в контролируемых условиях среды генофонда вегетативно размножаемых культур на примере малины, ежевики, картофеля – in vitro и криоколлекции 11
1.2.1. Методы in vitro сохранения образцов вегетативно размножаемых культур 11
1.2.2. Методы криоконсервации растений
1.2.2.1. Факторы, влияющие на показатели посткриогенной регенерации 24
1.2.2.2. Криоколлекции представителей рода Rubus (малины, ежевики) 33
1.2.2.3. Криоколлекции культурных видов картофеля 35
1.3. Оздоровление образцов in vitro колекций от вирусных инфекций 38
1.3.1. Значение оздоровленного материала для развития семеноводства 38
1.3.2. Вирусы малины 40
1.3.3. Вирусы картофеля 40
1.3.4. Методы оздоровления in vitro образцов вегетативно размножаемых растений 41
1.3.5. Эффективность различных методов оздоровления растений малины и ежевики от RBDV в системе in vitro
1.3.6. Эффективность различных методов оздоровления микрорастений картофеля от основных вирусов, включая PLRV .
ГЛАВА 2. Материалы и методы 54
2.1. Растительный материал 54
2.2. Методы исследований 56 57
2.2.1. Оценка способности к «эффективному клональному микроразмножению» образцов малины и ежевики .
2.2.2. Метод дроплет-витрификации для криоконсервации образцов малины, ежевики, картофеля .
2.2.3. Оздоровление микрорастений малины и картофеля от вирусов 59
2.2.4. Статистическая обработка результатов 64
ГЛАВА 3. Результаты и обсуждение 65
3.1. Изучение способности к «эффективному клональному микроразмножению» образцов малины и ежевики из in vitro коллекции ВИР
65
3.2. Оптимизация протокола дроплет-витрификации (DV) для криоконсервации образцов малины – анализ литературных данных, выбор оптимального типа эксплантов и продолжительности их обработки раствором криопротекторов 68
3.3. Изучение способности к посткриогенному восстановлению сортов малины и ежевики при использовании оптимизированного протокола дроплет-витрификации – «DV-biotech» 77
3.4. Изучение жизнеспособности и регенерационной способности после оттаивания у селекционных сортов и у коллекционных образцов культурных видов картофеля с использованием оптимизированного протокола «DV-biotech» 79
3.5. Оценка эффективности оздоровления микрорастений малины от вируса RBDV при использовании различных методов антивирусной терапии: химиотерапии, комплексной термо-химиотерапии и криотерапии на основе протокола «DV-biotech»
3.6. Изучение эффективности оздоровления микрорастений картофеля от вируса
скручивания листьев картофеля (PLRV) методами комплексной термо химиотерапии и криотерапии на основе оптимизированного протокола «DV-biotech»
Заключение 95
Выводы 98
Практические рекомендации 99
Список сокращений 100
Список литературы
