Введение
Глава 1. Обзор литературы
1.1 Противоопухолевые препараты, индуцирующие апоптоз опухолевых клеток 9
1.2. Молекулярные механизмы действия препаратов группы платина 11
1.2.1. Взаимодействие цисплатина с ДНК 11
1.2.2. Соединения платины и апоптоз 14
1.2.3. Лекарственная резистентность и соединения платины 29
1.2.4.Маркеры резистентности к цисплатину 32
1.2.5.Трансмембранный перенос соединений платины и их локализация в клетке 33
1.3. Характеристика методов регистрации апоптоза 34
Глава 2. Материалы и методы исследования 40
2.1. Материалы и реактивы 41
2.2. Клеточные линии 42
2.3. Оценка цитотоксического действия химиопрепаратов МТТ-тестом 43
2.4. Проточно-цитофлуориметрический анализ 44
2.5. Определение апоптоза методом двойного окрашивания 45
2.6. Определение активной каспазы-3 46
2.7.Исследование апоптоза методом TUNEL с использованием набора 47
Глава 3. Оценка цитотоксической активности препаратов группы платина с использованием МТТ - теста 49
3.1. Определение цитотоксической активности противоопухолевых препаратов циклоплатама, цисплатина, оксалиплатина, карбоплатина на клеточной линии Jurkat (Т-клеточный лимфобластоидный лейкоз человека) 50
3.2.Определение цитотоксической активности противоопухолевых препаратов циклоплатама, цисплатина, оксалиплатина, карбоплатина на клеточной линии Raji (В-клеточный лимфобластоидный лейкоз человека) 52
3.3. Определение цитотоксической активности противоопухолевых препаратов циклоплатама, цисплатина, оксалиплатина, карбоплатина на клеточной линии U 937(моноцитарная лимфома) 54
3.4. Определение цитотоксической активности противоопухолевых препаратов циклоплатама, цисплатина, оксалиплатина, карбоплатина на клеточной линии T47D (рак молочной железы) 56
3.5. Определение цитотоксической активности противоопухолевых препаратов циклоплатама, цисплатина, оксалиплатина, карбоплатина на клеточной линии меланомы человека mel Р 58
3.6. Определение цитотоксической активности противоопухолевых препаратов циклоплатама, цисплатина, оксалиплатина, карбоплатина на клеточной линии рака предстательной железы PC - 3 60
3.7. Определение цитотоксической активности противоопухолевых препаратов циклоплатама, цисплатина, оксалиплатина, карбоплатина на клеточной линии рака молочной железы MCF-7 62
3.8. Обобщение результатов полученных методом МТТ 64
Глава 4. Исследование лекарственно-индуцированного апоптоза методами проточной цитофлуориметрии 69
4.1. Определение лекарственно-индуцированного апоптоза методом двойного окрашиваниия Аннексин/PI, каспазы-3, Tunel на клеточной линии Jurkat 70
4.2. Определение лекарственно-индуцированного апоптоза методом двойного окрашиваниия Аннексин/PI, каспазы-3, Tunel на клеточной линии Raji 78
4.3. Определение лекарственно-индуцированного апоптоза методом двойного окрашиваниия Аннексин/РІ, каспазы-3, Tunel на клеточной линии U937 87
4.4. Определение лекарственно-индуцированного апоптоза методом двойного окрашиваниия Аннексин/РІ, каспазы-Зна клеточной линии mel Р 93
4.5. Определение лекарственно-индуцированного апоптоза методом двойного окрашиваниия Аннексин/PI, каспазы-3 на клеточной линии SKOV-3 98
4.6. Определение лекарственно-индуцированного апоптоза методом двойного окрашиваниия Аннексин/PI, каспазы-3-3, на клеточной линии MCF-7 103
4.7. Определение лекарственно-индуцированного апоптоза методом двойного окрашиваниия Аннексин/РІ, каспазы-3 на клеточной линии T47D 108
4.8. Определение лекарственно-индуцированного апоптоза методом двойного
окрашиваниия Аннексин/РІ, каспазы-3 на клеточной линии РС-3 113
Глава 5. Заключение 116
Выводы 124
Список литературы 125
