Введение
3. Обзор литературы 7
3.1. Стабильность ферментов в органических средах 8
3.1.1. Гомогенные растворы ферментов 10
3.1.2. Гетерогенные системы, содержащие фермент 13
3.2. Подходы к стабилизации ферментов в органических средах 21
3.3. Нековалентные комплексы полиэлектролитов 25
3.3.1. Интерполиэлектролитные комплексы 2 5
3.3.2. Белок - полиэлектролитные комплексы 30
3.3.3. Каталитические свойства и стабильность ферментов в комплексе с полиэлектролитом 32
3.4. Тирозиназа - полифенолоксидаза 35
3.4.1. Физиологическая роль тирозиназы, методы очистки и механизм катализа 35
3.4.2. Тирозиназа в органических средах 42
3.4.3. Некоторые аспекты применения тирозиназы в биосенсорах 44
4. Постановка задачи 46
5. Экспериментальная часть 47
5.1. Реагенты и приборы 47
5.2. Методы 48
5.2.1. Приготовление комплекса фермента с поликатионом 48
5.2.2. Определение каталитической активности тирозиназы в водных растворах 48
5.2.3. Определение каталитической активности тирозиназы в системе обращенных мицелл 48
5.2.4. Определение каталитической активности нативнои тирозиназы и в нековалентных комплексах с полиэлектролитами в водно-этанольной системе 49
5.2.5. Модификации элетродов и проведения электрохимических измерений 50
6. Результаты и обсуждение 52
6.1. Нековалентные комплексы тирозиназа с полибреном 52
6.1.1. Каталитическая активность комплексов в водных растворах: рН - зависимость 52
6.1.2. Каталитическая активность комплексов тирозиназа с полибреном в водно - этанольных смесях 57
6.2. Каталитическая активность тирозиназы в системе обращенных мицелл 65
6.3. Биоэлектрокаталитическая активность тирозиназы в водной среде: рН - зависимость 67
6.4. Биоэлектрокаталитическая активность тирозиназы в комплексе с полиэлектролитом в водных и водно-этанольных системах 73
6.5. Биоэлектрокаталитическая активность тирозиназы в системе обращенных мицелл в водной среде 79
6.6. Биоэлектрокаталитическая активность тирозиназы в ацетонитриле 87
6.7. Использование спрэй технологии для иммобилизации тирозиназы на твердом носителе (электроде) 91
7. Выводы 98
8. Список литературы
