Введение
Глава 1. Обзор литературы 16
1.1. Ботанико-фармакогностическая характеристика двух видов галантуса (подснежника) 16
1.1.1. Характеристика семейства Амариллисовых (Amaryllidaceae) 16
1.1.2. Характеристика рода Галантус, или Подснежник (Galanthus L.) 18
1.1.3. Характеристика подснежника Воронова и подснежника белоснежного 20
1.2. Химический состав метаболома подснежников Воронова и белоснежного 22
1.2.1. Состав и содержание амариллисовых алкалоидов двух видов подснежников 23
1.3. Фармакологическая активность, применение в медицине двух видов подснежников 27
1.4. Биологическая активность, физико-химические свойства, биосинтез амариллисовых алкалоидов двух видов подснежников 33
1.5. Физико-химические методы анализа амариллисовых алкалоидов 39
1.5.1. Тонкослойная хроматография в анализе амариллисовых алкалоидов 39
1.5.2. Высокоэффективная жидкостная хроматография и газовая хроматография в анализе амариллисовых алкалоидов 42
1.5.3. Спектрофотометрия в анализе амариллисовых алкалоидов 44
1.6. Стандартизация сырья и препаратов подснежников 44
Выводы к главе 1 48
Глава 2. Объекты и методы исследования 49
2.1. Характеристика объектов исследования 49
2.2. Методы анализа, оборудование 49
2.2.1.Определение амариллисовых алкалоидов 51
2.2.2.Определение флавоноидов 53
2.2.3. Определение гидроксикоричных кислот 53
2.2.4. Определение органических кислот 55
2.2.5. Определение аминокислот 56
2.2.6. Определение углеводов 57
2.2.7. Определение элементного состава 58
2.2.8. Определение биологической активности 60
2.3. Реактивы и стандартные образцы 61
2.4. Валидация методов, обработка полученных результатов 62
Глава 3. Макроскопический и микроскопический анализ гомеопатического лекарственного растительного сырья подснежников Воронова и белоснежного 63
3.1. Изучение внешних признаков сырья подснежников 63
3.2. Изучение микроскопических признаков сырья подснежников 66
3.2.1. Микроскопия листьев 66
3.2.2. Микроскопия цветков 67
3.2.3. Микроскопия луковиц 69
3.2.4. Микроскопия корней 72
Выводы к главе 3 74
Глава 4. Фитохимическое исследование гомеопатического лекарственного растительного сырья подснежников 75
4.1. Изучение амариллисовых алкалоидов ГомЛРС подснежников 77
4.1.1. Анализ амариллисовых алкалоидов в ГомЛРС подснежников качественными реакциями 78
4.1.2. Изучение алкалоидного состава ГомЛРС подснежников методом ТСХ 79
4.1.3. Изучение алкалоидного состава ГомЛРС подснежников методом ГХ-МС 81
4.1.4. Количественное определение суммы амариллисовых алкалоидов в ГомЛРС подснежников методом СФМ 85
4.2. Изучение флавоноидов ГомЛРС подснежников 88
4.3. Изучение гидроксикоричных кислот ГомЛРС подснежников 99
4.4. Изучение органических кислот ГомЛРС подснежников 101
4.5. Изучение аминокислот ГомЛРС подснежников 103
4.6. Изучение углеводов ГомЛРС подснежников 107
4.7. Изучение элементного состава ГомЛРС подснежников 109
Выводы к главе 4 113
Глава 5. Фитохимическое исследование настоек гомеопатических матричных подснежников Воронова и белоснежного 115
5.1. Определение компонентного состава НГМ методом ГХ-МС 115
5.2. Изучение амариллисовых алкалоидов НГМ подснежников 124
5.2.1. Подтверждение присутствия амариллисовых алкалоидов в НГМ подснежников качественными реакциями 124
5.2.2. Изучение состава амариллисовых алкалоидов НГМ подснежников методом ТСХ. 125
5.2.3. Изучение состава амариллисовых алкалоидов НГМ подснежников методом ГХ-МС 126
5.2.4. Количественное определение суммы амариллисовых алкалоидов в НГМ подснежников методом СФМ 128
5.3. Изучение флавоноидов НГМ подснежников 130
5.4. Изучение гидроксикоричных кислот НГМ подснежников 135
5.5. Изучение органических кислот НГМ подснежников 137
5.6. Изучение аминокислот НГМ подснежников 138
5.7. Изучение углеводов НГМ подснежников 142
5.8. Изучение элементного состава НГМ подснежников 144
Выводы к главе 5 146
Глава 6. Разработка и валидация ВЭЖХ-УФ метода количественного определения амариллисовых алкалоидов 148
6.1. Пробоподготовка образцов для анализа 148
6.2. Детектирование амариллисовых алкалоидов в извлечениях из ГомЛРС и НГМ 149
6.3. Поиск оптимальных условий для эффективного хроматографического разделения амариллисовых алкалоидов 151
6.4. Валидационные характеристики методики 154
6.4.1. Химические реактивы и материалы 154
6.4.2. Оборудование и его параметры 155
6.4.3. Условия хроматографического анализа и детектирование 155
6.4.4. Расчет содержания суммы амариллисовых алкалоидов 156
6.4.5. Приготовление стандартных растворов галантамина и ликорина 157
6.4.6. Приготовление образцов контроля качества и калибровочных образцов 158
6.4.7. Параметры пригодности хроматографической системы и метрологические характеристики методики 158
6.4.8. Специфичность 161
6.4.9. Линейность 162
6.4.10. Относительный коэффициент чувствительности детектора 164
6.4.11. Предел обнаружения и количественного определения 164
6.4.12. Правильность 164
6.4.13. Повторяемость и точность 166
6.4.14. Аналитическая область методики 167
6.4.15. Стабильность 167
6.4.16. Устойчивость 168
Выводы к главе 6 169
Глава 7. Разработка показателей качества гомеопатического лекарственного растительного сырья и настоек гомеопатических матричных подснежников Воронова и белоснежного 170
7.1. Определение влажности сырья, органической и минеральной примесей 170
7.2. Определение плотности, сухого остатка НГМ 171
7.3. Определение содержания амариллисовых алкалоидов в ГомЛРС, НГМ 172
7.4. Определение срока годности НГМ двух видов подснежников 173
Выводы к главе 7 175
Глава 8. Изучение биологической активности настоек гомеопатических матричных подснежников Воронова и белоснежного 176
8.1. Исследование цитотоксических эффектов НГМ подснежников Воронова, белоснежного 176
Выводы к главе 8 181
Общие выводы 182
Практические рекомендации 183
Перспективы дальнейшей разработки темы 183
Список сокращений 184
Литература 186
Приложения 208
Приложение 1. Акт внедрения в учебный процесс ФГБОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России результатов диссертационного исследования. 209
Приложение 2. Направление проектов ФС в ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» 210
Приложение 3. Проект ФС «Подснежник Воронова растения целые свежие – Galanthus woronowii planta tota recens» 211
Приложение 4. Проект ФС «Galanthus woronowii, Galanthus - Настойка гомеопатическая матричная» 226
Приложение 5. Проект ФС «Подснежник белоснежный растения целые свежие – Galanthus nivalis planta tota recens» 234
Приложение 6. Проект ФС «Galanthus nivalis, Galanthus - Настойка гомеопатическая матричная» 248
