Введение
1. Обзор литературы 9
1.1. Синтез и физико-химические свойства амфифильных блок-сополимеров 9
1.1.1. Плюроники 9
1.1.2. Полиглицерины 14
1.1.3. Сополимеры на основе полидиметилсилоксана 17
1.1.4. Взаимодействие амфифильных блок-сополимеров с модельными липидными мембранами и особенности структуры клеточных мембран 18
1.2. Множественная лекарственная устойчивость раковых клеток и ее преодоление с помощью плюроников 22
1.2.1. Влияние плюроников на устойчивость раковых клеток к лекарствам 23
1.2.2. Предполагаемые механизмы подавления активности P-гликопротеина плюрониками 27
1.3. Токсичность плюроников 34
1.4. Защитная роль плюроников 38
2. Эспериментальная часть .42
2.1.Материалы 42
2.2.Методы исследования 43
2.2.1. Определение молекулярно-массовых характеристик полимеров 43
2.2.2. Определение ККМ с помощью флюоресцентного зонда 43
2.2.3. Определение ККМ методом статического светорассеяния 44
2.2.4. Культивирование клеток 45
2.2.5. Определение цитотоксичности доксорубицина и полимеров 47
2.2.6. Влияние полимеров на цитотоксичность доксорубицина 48
2.2.7. Анализ накопления DOX в клетках 48
2.2.8. Получение меченных тритием полимеров 49
2.2.9. Радиоавтография 49
2.2.10. Получение конъюгата плюроника L61 с флуоресцеинизотиоцианатом .52
3. Результаты и их обсуждение 54
3.1 Характеристика исследованных соединений 54
3.1.1. Структура 54
3.1.2. Расчет гидрофильно-липофильного баланса 57
3.1.3. Критическая концентрация мицеллообразования 58
3.2. Цитотоксичность исследованных соединений 65
3.2.1. Определение цитотоксичности: обоснование метода 65
3.2.2. Токсичность доксорубицина для клеток MCF7/R 66
3.2.3. Цитотоксичность исследованных соединений 67
3.2.4. Сопоставление цитотоксичности и мицеллообразования исследованных соединений 73
3.3. Увеличение жизнеспособности клеток под действием ПЭО-содержащих блок-сополимеров 76
3.4. Влияние исследованных соединений на устойчивость раковых клеток к доксорубицину 86
3.4.1. Влияние плюроника L61 на чувствительность раковых клеток к доксорубицину 86
3.4.2. Определение минимальной концентрации соединения, достаточной для подавления лекарственной устойчивости 88
3.4.3. Зависимость степени подавления лекарственной устойчивости от концентрации исследованного соединения 89
3.4.4.Особенности действия некоторых блок-сополимеров на лекарственную устойчивость раковых клеток 93
3.4.5.Предполагаемый механизм подавления лекарственной устойчивости раковых клеток 98
3.5. Исследование локализации рассматриваемых соединений при их взаимодействии с клетками 100
3.5.1. Получение FITC-меченых блок-сополимеров 100
3.5.2. Влияние присоединенного FITC на свойства блок-сополимеров 101
3.5.3. Исследование локализации блок-сополимеров флуоресцентным методом 101
3.5.4. Исследование локализации методом радиоавтографии 105
Заключение 111
Выводы 116
Список цитированной литературы
