Введение
ГЛАВА 1. Биоэкология возбудителей токсокароза в условиях мегаполиса
1.1 Обзор литературы 13
1.1.1 Анализ зоонозного потенциала Toxocara сanis и T.cati 13
1.1.2 Эпизоотология токсокароза плотоядных 17
1.1.3 Обсемененность объектов внешней среды яйцами и личинками токсокар, их выживаемость и развитие
1.1.4 Копрологические методы диагностики токсокароза и исследования объектов внешней среды
1.2 Материалы и методы исследований 38
1.2.1 Сбор проб кала и методы исследования 39
1.2.2 Гельминтологическое вскрытие 39
1.2.3 Способ выделения личинок T.canis методом переваривания паренхимы легких и печени плотоядных животных
1.2.4 Исследование объектов внешней среды 41
1.3 Результаты исследований 42
1.3.1 Сравнительная эффективность методов копрологической диагностики токсокароза
1.3.2 Распространение основных паразитозов желудочно- кишечного тракта в популяции животных мегаполиса
1.3.3 Способ выделения личинок T.canis методом переваривания паренхимы легких и печени плотоядных животных
1.3.4 Исследование объектов внешней среды 49
Заключение по главе 1 З
ГЛАВА 2. Методы исследования нуклеотидных последовательностей ядерной и митохондриальной днк при дифференциации двух видов нематод рода тoxocara (сем. аscarididae, аscaridina)
2.1 Обзор литературы 59
2.1.1 Нуклеотидные последовательности рибосомальной ДНК 60
2.1.2 Нуклеотидные последовательности ITS участка ядерной ДНК 61
2.1.3 Нуклеотидные последовательности митохондриальной ДНК 63 (мтДНК)
2.1.4 Полимеразная цепная реакция 71
2.2 Материалы и методы исследований 73
2.2.1. Выделение ДНК 74
2.2.1.1 Выделение ДНК при помощи набора фирмы «Promega» 74
2.2.1.2 Протеиназный метод 2.2.2 Проведение ПЦР 75
2.2.3 Визуализация результатов ПЦР 76
2.2.4 Очистка ДНК 78
2.2.5 Метод векторного клонирования 79
2.3 Результаты исследований 80
2.3.1 Нуклеотидные последовательности большой субъединицы 81 рибосомы (LSU) ядерной ДНК T.сanis и T.сati
2.3.2 Нуклеотидные последовательности ITS участка ядерной ДНК 81 T.сanis и T.сati
2.3.3 Нуклеотидные последовательности цитохромоксидазы I 91 (CoxI) митохондриальной ДНК T.сanis и T.сati
2.3.4 Результаты клонирования 92
Заключение по главе 2 93
ГЛАВА 3. Диагностика Токсокароза иммуноферментной реакцией (ИФА, ELISA)
3.1 Обзор литературы 95
3.1.1. Имунный ответ хозяина при токсокарозе 95
3.1.2. Антигены токсокар 103
3.1.3. Серологические методы диагностики токсокароза 110
3.2 Материалы и методы исследований 120
3.2.1 Отбор сывороток крови 120
3.2.2 Получение соматического антигена 121
3.2.3 Постановка иммуноферментной реакции 121
3.3 Результаты исследований 123
3.3.1 Определение оптимальной концентрации антигена 123
3.3.2 Определение оптимального режима сорбции антигена на планшетах
3.3.3 Определение оптимального диагностического титра исследуемых сывороток крови плотоядных
3.3.4 Определение оптимального разведения конъюгата 127
3.3.5 Определение оптимальных режимов работы с субстратом 127
3.3.6 Определение чувствительности и специфичности ИФА при диагностике спонтанного токсокароза плотоядных
3.3.7 Сероэпизоотологический контроль над токсокарозом 132
плотоядных с помощью ИФА
Заключение по главе 3 133
Обсуждение 135
Выводы 148
Практические предложения 150
Список сокращений и условных обозначений 151
Список литературы
