Введение
Глава 1. Обзор литературы 11
1.1. Генетическая основа механизмов старения 11
1.2. Эффект малых доз различных стрессов на продолжительность 13
1.3. Механизм стресс-ответа на воздействие ионизирующей радиации 16
1.4. Механизмы воздействия стресс-факторов разных типов 21
1.4.1. Механизм стресс-ответа на изменение температуры 21
1.4.2. Голодание как стресс-фактор, влияющий на продолжительность жизни 29
1.4.3. Инфекционный стресс в качестве горметического агента 36
1.5. Общность механизмов стресс-ответа и гормезиса 38
1.6. Методы оценки уровня мРНК генов 39
Глава 2. Материалы и методы 47
2.1. Линии Drosophila melanogaster 47
2.2. Условия содержания 47
2.3. Условия воздействия стресс-факторов 47
2.3.1. Воздействие ионизирующей радиацией 47
2.3.2. Грибковое заражение 48
2.3.3. Холодовой шок 49
2.3.4. Голодание 50
2.4. Анализ продолжительности жизни 50
2.5. Оценка возрастной динамики локомоторной активности особей Drosophila melanogaster после воздействия анализируемых стресс-факторов 51
2.6. Экспрессионный анализ 52
2.6.1. Выделение и проверка качества РНК 52
2.6.2. Количественная ПЦР 53
2.6.3. Статистический анализ данных ПЦР-РВ 55
2.6.4. Секвенирование транскриптома 56
Валидация библиотек 57
Процедура высокопроизводительного секвенирования (NGS) 57
Обработка данных секвенирования 57
Глава 3. Результаты 59
3.1. Анализ воздействия малых доз ионизирующей радиации на продолжительность жизни особей Drosophila melanogaster 59
3.2. Анализ экспрессии 29 генов в ответ на воздействие малых доз ионизирующей радиации 3.2.1. Анализ дифференциальной экспрессии в образцах мужских особей 72
3.2.2. Анализ дифференциальной экспрессии в образцах женских особей 74
3.2.3. Сравнение экспрессионной динамики анализируемых генов у особей разного пола 75
3.3. Анализ выживаемости особей, подвергнутых воздействию разных стресс-факторов 77
3.4. Анализ локомоторной активности особей, подвергнутых воздействию разных стресс-факторов 80
3.5. Анализ транскриптомов особей, подвергнутых воздействию разных стресс-факторов 81
Глава 4. Обсуждение результатов 96
Выводы 103
Список литературы 104
