Введение
1. Общая характеристика работы 8
2. Обзор литературы 10
2.1. Природа спилловер-водорода 10
Атомарная природа спилловер-водорода 11
Нз частицы 16
Ионные пары 16
Нойоны 18
2.2. Термическая активация трития. Тритиевая планиграфия 23
2.3. Активация трития ВЧ разрядом 37
2.4. Реакция высокотемпературного твердофазного каталитического изотопного обмена 41
2.5. Исследование региоселективности изотопного обмена водородных атомов твердого органического соединения 48
2.6. Исследование механизма твердофазных реакций с использованием квантово-химического моделирования 52
3. Экспериментальная часть 65
3.1. Материалы и приборы 65
3.2. Методы исследования 67
3.2.1. ВТКИО водорода на тритий 67
ВТКИО в пептидах 67
ВТКИО в белках 68
3.2.2. Очистка р-галактозидазы 68
Приготовление клеточных экстрактов 68
Фракционирование сульфатом аммония 69
Гель-фильтрация 69
Анион-обменная хроматография 69
3.2.3. Определение ферментативной активности В-галактозидазы и В-глюкозидазы 69
3.2.4. Определение концентрации белка 70
3.2.5. Подготовка белка к протеолизу 70
3.2.6. Гидролиз белка глутамилэндопептидазой из Bacillus intermedius 71
3.2.7. ВЭЖХ продуктов гидролиза В-галактозидазы. 71
3.2.8. Определение радиоактивности растворов 71
3.2.9. ЯМР-спектроскопия 72
3.2.10. Методика ab initio расчетов. 72
3.2.11. Определение доступности С-Н связей в а-конотоксине G1 73
4. Результаты и обсуждение 74
4.1. Исследование твердофазного изотопного обмена в пептидах 74
4.2. Исследование твердофазного изотопного обмена в белках 89 ВЫВОДЫ 98 Благодарности 99
Приложение а 100
Список литературы
