Введение
ГЛАВА 1. Внеклеточный матрикс соединительных тканей 8
1.1. Общий состав и строение соединительных тканей 8
1.2. Гликозаминогликаны, протеогликаны, протеогликановые агрегаты и методы их определения в ткани. 12
1.2.1. Гликозаминогликаны (ГАГ) 12
1.2.2. Протеогликаны 14
1.2.3. Протеогликановые агрегаты 16
1.2.4. Методы количественного определения гликозаминогликанов 17
1.3. Коллаген как важнейшая составляющая соединительных тканей. Методы определения в ткани. 22
1.3.1. Синтез и посттрансляционная модификация коллагена. 22
1.3.2. Морфологические формы и типы коллагена. 26
1.3.3 Методы количественного определения коллагена в соединительных тканях 32
1.4. Взаимодействие протеогликанов и коллагена. 36
1.5. Роль коллагеновой и протеогликановой подсистем в обеспечении механических свойств хрящевой ткани. 39
ГЛАВА 2. Модификация структуры соединительных тканей лазерным воздействием и ферментативной обработкой 40
2.1. Субабляционное лазерное воздействие на биоткани. 40
2.2. Модификация структуры хрящевой ткани с помощью ферментативной обработки (удаление ГАГ иПГ) 43
2.2.1. Ферменты, действующие на матрикс хрящевой ткани 44
2.2.1.1. Гликозидазы 44
2.2.1.2. Протеазы 45
2.3. Влияние ферментативной обработки на свойства соединительных тканей. 46
ГЛАВА 3. Физико-химические методы, применяющиеся для исследований изменений в соединительных тканях при термическом нагреве и обработке ферментами 53
3.1. Денатурация коллагена. Дифференциальная Сканирующая Калориметрия — основной метод при исследовании денатурации коллагена. 53
3.1.1. Представление о денатурации коллагена как о фазовом переходе первого рода 53
3.1.2. Представление о денатурации коллагена, как о кинетическом процессе 65
3.1.3. Особенности денатурации коллагена в тканях. Метод ДСК 71
3.2. ИК спектроскопия и спектроскопия комбинационного рассеяния (КР) соединительных тканей... 75
3.3. Сорбция паров воды биологическими объектами. 80
ГЛАВА 4. Реактивы, приборы, материалы и методики 85
4.1. Образцы тканевых материалов и реактивы 85
4.1.1. Образцы тканевых материалов 85
4.1.2. Реактивы 86
4.2. Методы 88
4.2.1. ИК лазерная обработка. 88
4.2.2. Контроль температуры поверхности хрящевой ткани при ИК — лазерной обработке 89
4.2.3. Дифференциальная Сканирующая Калориметрия (ДСК) 90
4.2.4. Термомеханический анализ 91
4.2.5. Термогравиметрический анализ 91
4.2.6. Спектроскопия Комбинационного Рассеяния (КР) 91
4.2.7. Изотермы сорбции 92
4.2.8. Гистохимия 92
4.3 Методики. 93
4.3.1. Методика полного аминокислотного анализа. Гидролиз тканей 93
4.3.2. Методика спектрофотометрического определения гидроксипролина в гидролизате 95
4.3.3. Ферментативная обработка тканей и методика определения степени денатурации коллагена. 97
4.3.4. Количественный анализ гликозаминогликанов в растворе 98
4.3.5. Методика исследования деградации протеогликановой составляющей хрящевой ткани 100
Результаты и обсуждение 102
ГЛАВА 5. Состав соединительных тканей. термическая стабильность коллагена в тканях 102
5.1. Определение остаточного количества воды в образцах тканей 103
5.2 Определение содержания коллагена в соединительных тканях. 104
5.2.1 Количественное определение содержания гидроксипролина в различных соединительных тканях. 104
5.2.1.1 Определение аминокислотного состава хроматографическим методом 104
5.2.1.2 Определение Hyp спектрофотометрическим методом 106
5.2.1.3 Изучение влияния хондроитинсульфата на точность спектрофотометрического определения Hyp. 107
5.2.1.4 Сравнение результатов измерений содержания гидроксипролина по двум методикам 108
5.2.2 Количественное определение содержания коллагена в различных тканях 110
5.2.2.1 Вычисление содержания Hyp в коллагенах I и II 110
5.2.2.2 Определение количественного содержания коллагена в различных тканях 112
5.3 Определение содержания гликозаминогликанов в соединительных тканях. 113
5.4 Термическая стабильность коллагена в различных тканях. 114
5.4.1 Термическая стабильность коллагена I в тканях. 115
5.4.1.1 Термическая стабильность коллагена I ФСТ, выделенного из лицевых мышц 115
5.4.1.2 Термическая стабильность коллагена I ФСТ, вьшеленной из связок межпозвоночного диска (МПД).
117
5.4.1.3 Термическая стабильность коллагена І в склере и капсуле с имплантантом 118
5.4.2 Термическая стабильность коллагена II 127
5.4.2.1 Термическая стабильность коллагена II, выделенного из хрящевой ткани, пульпозного ядра МПД и ГЗП 127
5.4.2.2 Термическая стабильность коллагена II в хрящевой ткани, пульпозном ядре МПД и ГЗП 135
5.4.2.3. Влияние ГАГ на денатурацию коллагена II в тканях 144
ГЛАВА 6. Лазерное воздействие на биоткани 149
6.1 Лазерное воздействие на фиброзную соединительную ткань 149
6.2 Лазерное воздействие на хрящевую ткань носовой перегородки. 757
6.2.1. Модификация сети коллагеновых фибрилл ИКлазерным излучением. 159
Выводы 174
Список литературы
