Введение
Глава 1. Обзор литературы 9
1.1 Альтернариоз пасленовых культур 9
1.2 Современное представление о видовом составе грибов рода Alternariana пасленовых культурах
1.2.1 Таксономия рода Altemaria 14
1.2.2 Молекулярная идентификация видов Altemaria 18
1.2.3 Виды Altemaria - патогены пасленовых культур 19
1.2.4 Внутривидовое разнообразие видов Altemaria, ассоциированных с пасленовыми культурами 23
1.3 Патогенные свойства Altemaria spp. 25
1.3.1 Методы изучения взаимоотношений в патосистеме Altemaria spp. - паслёновые культуры 25
1.3.2 Патогенность возбудителей альтернариоза 29
Глава 2. Материалы и методы исследований 3 2
2.1. Изоляция грибов в чистую культуру 32
2.2 Идентификация и исследование макро- и микроморфологии изолятов 33
2.2.1 Исследование морфологических признаков 33
2.2.2 Оценка влияния условий культивирования на микроморфологические признаки изолятов мелкоспоровых видов 34
2.1.1 Коллекция чистых культур 35
2.3 Молекулярно-генетические методы 35
2.3.1 Выделение ДНК из мицелия грибов 35
2.3.2 Выделение ДНК из гербарного материала 36
2.3.3 Разработка праймеров, специфичных для комплекса видов A. solanV Ъ1
2.3.4 ПЦР с видосиецифичными праймерами 38
2.3.5 ПЦР с универсальными праймерами (UP-PCR) 39
2.3.6 ПЦР со случайной амплификацией полиморфной ДНК (RAPD-PCR) 40
2.3.7 Визуализация результатов амплификации 41
2.4 Оценка патогенносте изолятов Altemaria 42
2.4.1 Условия эксперимента 42
2.4.2 Получение инокулюма и стимуляция спороношения г
2.4.3 Усовершенствование лабораторной методики оценки агрессивности крупноспоровых видов Alternaria 44
2.4.4 Оценка агрессивности видов Alternaria при совместном заражении 44
2.5 Статистические методы 45
Результаты и обсуждение исследований
ГЛАВА 3. Биоразнообразие и распространение грибов рода alternaria на пасленовых культурах на территории России 46
3.1 Разнообразие мелкоспоровых видов Alternaria по микро- и макроморфологическим признакам 46
3.1.1 Анализ морфологических признаков изолятов мелкоспоровых видов AIternaria 46
3.1.2 Влияние условий культивирования на морфологические признаки изолятов мелкоспоровых видов Alternaria
3.2 Разнообразие крупноспоровых видов Alternaria по микро- и макроморфологическим признакам 53
3.3 Распространение видов Alternaria на пасленовых культурах на территории России 3.3.1 Распространение видов Alternaria на картофеле 56
3.3.2 Распространение видов Alternaria на томате 58
3.3.3 Распространение видов Alternaria на перце 59
3.3.4 Распространение видов Alternaria на баклажане 60
3.3.5 Распространение видов Alternaria на декоративных пасленовых 60
3.3.6 Анализ видового состава возбудителей альтернариоза пасленовых культур 61
3.3.7 Создание коллекции чистых культур рода Alternaria 64
Глава 4. Молекулярная идентификация видового и внутривидового разнообразия грибов рода alternaria, распространенных на пасленовых культурах 65
4.1 Молекулярная идентификация видов Alternaria в пораженных растительных тканях 65
4.1.1 Разработка праймеров, специфичных к комплексу видов А. solanf 65
4.1.2 Молекулярная идентификация видов Alternaria в пораженных растительных тканях н
4.2 Дифференциация изолятов комплекса видов lA. solanV по молекулярным маркерам 70
4.3 Сравнительный анализ результатов морфологического и молекулярного исследования изолятов комплекса видов A. solanp 1А
Глава 5. Патогенность видов alternaria по отношению к картофелю и томату 76
5.1 Патогенность крупноспоровых видов Alternaria 76
5.1.1 Усовершенствование лабораторной методики оценки патогенности крупноспоровых видов Alternaria 76
5.1.2 Оценка патогенносте видов A. solani и A. tomatophila 79
5.2 Патогенность мелкоспоровых видов Alternaria 82
Выводы 86
Список использованной литературы
