Введение
1. Литературный обзор 8
1.1. Современные представления о тератогенезе 8
1.1.1. Основные закономерности тератогенеза 8
1.1.2. Механизмы тератогенеза 17
1.1.2.1. Генотоксические механизмы тератогенеза 18
1.2. Современные принципы исследования тератогенеза 21
1.2.1. Генотоксикологические подходы к исследованию тератогенеза 23
1.2.2. Тератогенный эффект циклофосфамида 24
1.3. Профилактика тератогенеза 25
1.3.1. Антимутагенная профилактика тератогенеза 27
1.3.1.1. Антимутагенные свойства афобазола 29
2. Материалы и методы 31
2.1. Препараты и режимы введения 31
2.2. Экспериментальные животные 32
2.3. Методы исследования антитератогенной активности на модельн ых животных 33
2.3.1. Метод Вильсона 34
2.3.2. Метод П. Петерса 35
2.4. Метод «ДНК-комет» 36
3. Результаты 39
3.1. Модель тератогенного действия циклофосфамида 39
3.2. Влияние афобазола на эмбриотоксические эффекты циклофосфамида 40
3.3. Оценка влияния афобазола на тератогенез индуцированный циклофосфамидом 41
3.3.1. Влияние афобазола при однократном введении на тератогенные эффекты циклофосфамида 41
3.3.1.1. Макроскопическое исследование плодов 41
3.3.1.2. Микроанатомическое исследование внутренних органов эмбрионов...43
3.3.1.3. Оценка состояния костной системы 44
3.3.2. Влияние афобазола при трехдневном введении на тератогенные " эффекты циклофосфамида 46
3.3.2. 1. Макроскопическое исследование плодов 47
3.3.2. 2. Микроанатомическое исследование внутренних органов эмбрионов...48
3.3.2. 3. Оценка состояния костной системы 49
3.4. Оценка влияния афобазола на генотоксические эффекты циклофосфамида 51
3.4.1. Влияние афобазола на ДНК-повреждения и апоптотический эффект циклофосфамида в эмбриональной и плацентарной тканях крыс при 20 часовой экспозиции 52
3.4.1.1. Плацента 52
3.4.1.2. Эмбрион 54
3.4.2. Влияние афобазола на ДНК-повреждения и апоптотический эффект циклофосфамида в эмбриональной и плацентарной ткани крыс при 24 часовой экспозиции 56
3.4.2.1. Плацента 56
3.4.2.2. Эмбрион 57
3.5. Количественная оценка ДНК-повреждений в эмбриональной и плацентарной тканях 59
3.5.1. Распределение частот клеток с ДНК различной степени фрагментации в группе животных позитивного контроля 60
3.5.1.1. 20 часовая экспозиция 60
3.5.1.2. 24 часовая экспозиция 61
3.5.2. Распределение частот клеток с ДНК различной степени фрагментации в группе животных негативного контроля 62
3.5.2.1. 20 часовая экспозиция 62
3.5.2.2. 24 часовая экспозиция 64
3.5.3. Сравнительная оценка распределения частот клеток с ДНК различной степени фрагментации в экспериментальных группах животных 65
3.5.3.1. 20 часовая экспозиция 65
3.5.3.2. 24 часовая экспозиция 68
3.6. Оценка корреляционной связи между антигенотоксическим и антитератогенным эффектами афобазола 69
3.6.1. Анализ взаимосвязи между степенью поврежденности ДНК в клетках плацент и эмбрионов и влиянием афобазола на эти негативные эффекты 69
3.6.1.1. 20 часовая экспозиция 70
3.6.1.2. 24 часовая экспозиция 72
3.6.2. Анализ зависимости выхода поврежденных ДНК в клетках эмбрионов от количества нормальных, поврежденных и апоптотических клеток в плаценте 73
3.6.2.1. 20 часовая экспозиция 74
3.6.2.2. 24 часовая экспозиция 75
3.6.3. Анализ зависимости появления пороков развития у эмбрионов от количества нормальных, поврежденных и апоптотических клеток в ткани плацент и эмбрионов 77
3.6.3.1. 20 часовая экспозиция 78
3.6.3.1.1 Плацента 78
3.6.3.1.2 Эмбрион 84
3.6.3.2. 24 часовая экспозиция 86
3.6.3.2.1 Плацента 86
3.6.3.2.2 Эмбрион 93
Обсуждение результатов 98
Выводы 115
Список литературы 116
Приложение 138
