Введение
1. Обзор литературы 7
1.1. Общая характеристика растений рода солодка (Glycyrrhiza) 7
1.1.1. Использование солодки в народном хозяйстве 8
1.2. Общая характеристика культивируемых in vitro клеток и тканей растений 9
1.3. Сомаклональная вариация культивируемых клеток in vitro 17
1.4. Анализ полиморфизма генома методом полимеразной цепной реакции 25
1.5. Организация митохондриального генома растительной клетки 28
2. Материалы и методы 36
2.1. Объект исследований 36
2.2. Условия культивирования каллусной ткани 36
2.3. Условия стерилизации 36
2.4. Определение прироста сырой биомассы каллуса 38
2.5. Определение размеров клеток каллуса 38
2.6. Спектрофотометрический метод количественного определения пигментов 39
2.7. Спектрофотометрический метод определения содержания глицирризиновой кислоты 39
2.8. Спектрофотометрический метод определения суммарного содержания фенольных соединений 40
2.9. Экстрагирование фитогормонов из растительной навески 41
2.10.Определение содержания фитогормонов методом ИФА 41
2.11 .Выделение тотальной ДНК 42
2.12.Выделение митохондриальной ДНК 43
2.13. Полимеразная цепная реакция 44
2.14. Расщепление митохондриальной ДНК рестрицирующими эндонуклеазами 45
2.15. Электрофоретическое разделение ДНК в агарозном геле 46
2.16. Использованные реактивы 46
3. Результаты и обсуждение 48
3.1. Получение линий каллуснои ткани солодки голой 48
3.2. Характеристика линий каллуснои ткани солодки голой 50
3.3. Влияние света на морфофизиологические параметры каллуснои ткани солодки голой 53
3.4. Анализ скорости роста линий каллуснои ткани солодки голой в зависимости от времени года 60
3.5. Способ ускорения роста каллуснои ткани солодки голой 69
3.6. Содержание фенольных соединений и глицирризиновой кислоты в каллуснои ткани солодки голой в ходе длительного культивирования 72
3.7. Содержание фитогормонов в каллуснои ткани солодки голой 78
3.8. Анализ тотальной ДНК длительно культивированных in vitro линий каллуснои ткани солодки голой методом RAPD-ПЦР 86
3.9. Анализ митохондриальной ДНК длительно культивированных in vitro линий каллуснои ткани солодки голой методом ПДРФ 92
Заключение 104
Выводы 108
Список литературы 109
Приложения 133
