Введение
1 Обзор литературы 15
1.1 Температура как лимитирующий фактор среды 15
1.2 Адаптации гидробионтов к изменению температурного режима 17
1.3 Холодоустойчивость беспозвоночных 21
1.3.1. Постановка проблемы исследования вопроса холодоустойчивости 21
1.3.2 Понятие холодоустойчивости. Стратегии и адаптации 23
1.4 Неспецифические механизмы стресс–адаптации 26
1.4.1 Антиоксидантная система как ключевой механизм неспецифической клеточной стресс резистентности 26
1.5 Энергетический метаболизм гидробионтов в условиях стресса 30
1.5.1 Основы энергетического баланса живых организмов 31
1.5.2 Энергетика и регуляция метаболизма ракообразных 32
1.6 Озеро Байкал и изменения климата. Феномен несмешиваемости фаун 37
2 Объект и методы исследования 40
2.1.1 Систематика и экология изучаемых видов 41
2.1.2 Известные показатели терморезистентности и термопреференции изучаемых видов. 46
2.1.3 Методика сбора и содержания исследуемых видов амфипод 47
2.2 Методы постановки и проведения экспериментов 48
2.2.1 Длительная акклимация амфипод при температурах, отличных от предпочитаемых температур исследуемых видов 49
2.2.2. Длительная акклимация амфипод при температурах, отличных от среднегодовой 50
2.3 Методы биохимического анализа 52
2.3.1 Определение активности ферментов антиоксидантной системы и лактатдегидрогеназы 2.3.1.1 Выделение и пробоподготовка образцов 52
2.3.1.2 Определение активности каталазы 52
2.3.1.3 Определение активности пероксидазы 53
2.3.1.4 Определение активности глутатион S-трансферазы 54
2.3.1.5 Определение активности лактатдегидрогеназы 54
2.3.1.6 Определение концентрации общего белка по методу М. Бредфорд 55
2.3.2 Определение содержания энергетических метаболитов 55
2.3.2.1 Выделение метаболитов и пробоподготовка 55
2.3.2.2 Определение содержания лактата 56
2.3.2.3 Определение содержания глюкозы и гликогена 57
2.3.2.4 Определение содержания аденозинтрифосфорной кислоты 58
2.3.3 Определение активности ферментов аэробного метаболизма 59
2.3.3.1 Выделение и подготовка образцов 59
2.3.3.2 Определение активности цитратсинтазы и цитохромоксидазы 59
2.4 Обсчет и статистическая обработка данных 60
3 Результаты 61
3.1 Оценка выживаемости байкальских и голарктических амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 61
3.2 Оценка выживаемости байкальских и голарктических амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от среднегодовой температуры литорали оз. Байкал 63
3.3 Оценка неспецифического стресс-ответа по показателям изменения активности ферментов антиоксидантной системы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам 65
3.3.1 Оценка активности пероксидазы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 65
3.3.2 Оценка активности каталазы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 68
3.3.3 Оценка активности глутатион S-трансферазы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 71
3.4 Оценка неспецифического стресс-ответа по показателям изменения компонентов антиоксидантной системы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от среднегодовой температуры литорали оз. Байкал 74
3.4.1 Оценка активности пероксидазы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от среднегодовой температуры литорали оз. Байкал 74
3.4.2 Оценка активности каталазы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от среднегодовой температуры литорали оз. Байкал 77
3.4.3 Оценка активности глутатион S-трансферазы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от среднегодовой температуры литорали оз. Байкал 79
3.5 Оценка аэробного и анаэробного энергетического метаболизма у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 82
3.5.1 Оценка содержания глюкозы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 82
3.5.2 Оценка содержания гликогена у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 84
3.5.3 Оценка содержания АТФ у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 86
3.5.4 Оценка активности цитохромоксидазы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 88
3.5.5 Оценка активности цитратеинтазы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 89
3.5.6 Оценка содержания лактата у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 91
3.5.7 Оценка активности лактатдегидрогеназы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от предпочитаемых 93
3.6 Оценка аэробного и анаэробного энергетического метаболизма у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от среднегодовой температуры литорали оз. Байкал 96
3.6.1 Оценка активности цитохромоксидазы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от среднегодовой температуры литорали оз. Байкал 96
3.6.2 Оценка активности цитратсинтазы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от среднегодовой температуры литорали оз. Байкал 99
3.6.3 Оценка содержания лактата у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от среднегодовой температуры 101
3.6.4 Оценка активности лактатдегидрогеназы у амфипод в условиях длительной акклимации к температурам, отличным от среднегодовой температуры литорали оз. Байкал 103
Выводы 120
Список используемых сокращений 122
