Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 11
1.1. Микробные биопленки 11
1.1.1. Образование биопленок 12
1.1.2. Структура биопленок 14
1.1.3. Биопленки и биоматериал-ассоциированные инфекции 16
1.2. Бактерии рода Staphylococcus 18
1.1.1. Бактерии вида S. epiderm idis 19
1.2.1. Роль S. epiderm idis в БАИ 20
1.3. Факторы, влияющие на первые этапы образования биопленок 21
1.3.1. Окружающая среда 21
1.3.2. Поверхность материала 24
1.3.3. Характеристики бактериальной клетки 27
1.3.4. Белки сыворотки и тканей человека 32
1.4. Антибактериальные пептиды 36
Экспериментальная часть 39
Глава 2. Материалы и методы исследования 39
2.1. Бактериальные штаммы и среды 39
2.2. Культивирование и подготовка бактерий S. epidermidis 42
2.3. Определение количества колониеобразующих единиц 42
2.4. Определение способности бактерий S. epidermidis к секреции полисахаридного межклеточного адгезина 42
2.5. Определение минимальной подавляющей концентрации 42
2.6. Определение дзета-потенциала бактериальных клеток 43
2.7. Выделение полной геномной ДНК 44
2.8. Предобработка поверхности полистирола плазмой, сывороточными белками и катионными пептидами
2.9. Определение гидрофобности поверхностей бактериальных клеток и полистирола 44
2.10. Предобработка бактериальных клеток гидролитическими ферментами и антибактериальными пептидами 45
2.11. Определение адгезионной способности бактериальных клеток 46
2.12. Определение биопленкообразующей способности бактерий 47
2.13.Изучение действия ферментов и антибактериальных соединений на суточные биопленки 48
2.14. Атомно-силовая микроскопия 49
2.15. Получение и анализ фильтратов среды с ранних этапов образования биопленок 49
2.16. Статистика 50
Глава 3. Характеристика использованных в работе штаммов бактерий s epidermidis 51
Глава 4. Влияние физико-химических условий на адгезию бактерий s epidermidis 56
4.1. Зависимость адгезии бактерий S. epidermidis от гидродинамических условий культивирования 56
4.2. Изучение влияния температуры среды инкубации на адгезию бактерий S. epidermidis 58
4.3. Зависимость адгезии бактерий S. epidermidis от кислотности среды 60
4.4. Влияние осмолярности среды на адгезию и образование биопленок бактерий S. epidermidis 61
4.5. Адгезия и образование биопленок бактериями S. epidermidis при внесении в среду глюкозы 65
Глава 5. Влияние соединений, меняющих свойства бактериальной поверхности, на адгезию и образованиебиопленок бактерий s epidermidis 67
5.1. Зависимость адгезии бактерий S. epidermidis от содержания в среде ионов
двухвалентных металлов 67
5.2. Влияние ЭДТА на адгезию и развитие биопленок бактериями S. epidermidisl\
5.3. Действие детергентов на адгезию бактерий S. epiderm idis 73
5.4. Влияние бактерицидных соединений на адгезию и образование биопленок бактериями S. epiderm idis 74
5.5. Действие мембранотропных соединений на адгезию и образование биопленок бактериями S. epidermidis 77
5.6. Действие гидролитических ферментов, периодата натрия и ДНК на адгезию и формирование биопленок бактериями S. epidermidis 78
5.7. Действие гидролитических ферментов и периодата натрия на сформированные биопленки бактерий S. epidermidis 85
Глава 6. Действие антибиотических соединений на адгезию и образование биопленок бактериями s epidermidis 89
6.1. Действие линезолида на адгезию и образование биопленок бактериями S. epidermidis 89
6.2. Действие антибактериальных пептидов на адгезию и образование биопленок бактериями S. epiderm idis 90
Глава 7. Изучение адгезии бактерий s epidermidis в присутствии компонентов крови 100
Глава 8. Изучение регуляции процессов адгезии бактерий s epidermidis 105
Заключение по выводы 116
Список литературы 1
