Введение
Глава 1 Обзор литературы 9
1.1 Механизмы развития окислительного стресса и его роль в патогенезе токсических поражений печени 9
1.2 Механизм действия флавоноидов и их применение при токсических поражениях печени 28
Выводы по обзору литературы 39
Список сокращений 40
Глава 2 Материалы и методы исследования 41
2.1 Характеристика объектов исследования 41
2.2 Лабораторные животные и экспериментальные модели 42
2.3 Постановка опытов и основные экспериментальные серии 43
2.3.1 Изучение влияния флавоноидов на интенсивность перекисного окисления ли-пидов и антиоксидантную систему печени в условиях острого ССІ4-гепатоза 43
2.3.2 Изучение влияния флавоноидов на продукцию N0 44
2.3.3 Изучение влияния флавоноидов на интенсивность перекисного окисления ли-пидов и антиоксидантную систему печени при курсовой алкоголизации 44
2.3.4 Изучение влияния курсового введения флавоноидов на интенсивность перекисного окисления липидов и антиоксидантную систему печени у здоровых животных 45
2.3.5 Изучение влияния флавоноидов на ферменты микросомальной системы, состояние митохондриальных процессов и энергообмена в печени при остром ССЦ-гепатозе 45
2.3.6 Изучение влияния флавоноидов на ферменты микросомальной системы, состояние митохондриальных процессов и энергообмена в печени при курсовой алко-голизаии 45
2.3.7 Изучение влияния курсового введения флавоноидов на ферменты микросо мальной системы, состояние митохондриальных процессов и энергообмена в печени у здоровых животных 46
2.3.8 Определение острой токсичности 46
2.3.9 Обоснование выбора доз исследуемых веществ 47
2.4 Методы исследования 47
2.4.1 Оценка поражения печени по биохимическим показателям 47
2.4.1.1 Определение активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови 47
2.4.1.2 Определение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови 47
2.4.1.3 Определение содержания общего билирубина в сыворотке крови 47
2.4.1.4 Определение содержания триглицеридов в сыворотке крови и печени 47
2.4.1.5 Определение содержания фосфолипидов в печени 48
2.4.1.6 Определение содержания гликогена в печени 48
2.4.1.7 Определение содержания глюкозы в сыворотке крови 48
2.4.2. Оценка интенсивности перекисного окисления липидов (ПОЛ) 48
2.4.2.1 Определение содержания ТБК-активных продуктов в сыворотке крови 48
2.4.2.2 Определение содержания ТБК-активных продуктов в гомогенате печени 49
2.4.2.3 Определение содержания диеновых конъюгатов в гомогенате печени 49
2.4.2.4 Определение интенсивности спонтанного и индуцированного ПОЛ 49
2.4.3. Оценка состояния эндогенной антиоксидантной системы 50
2.4.3.1 Определение активности супероксиддисмутазы 50
2.4.3.2 Определение активности каталазы 50
2.4.3.3 Определение содержания восстановленного глутатиона в печени 51
2.4.3.4 Определение активности глутатионпероксидазы в печени 51
2.4.3.5 Определение активности глутатион-Б-трансферазы в печени 51
2.4.3.6 Определение НАДФ+-редуктазной активности печени 52
2.4.3.7 Определение активности глутатионредуктазы в печени 52
2.4.3.8 Определение общей антиокислительной активности сыворотки крови 52
2.4.4 Оценка резистентности биомембран и окислительно-восстановительного баланса тиолов 53
2.4.4.1 Определение активности кислой фосфатазы в сыворотке крови 53
2.4.4.2 Определение интенсивности спонтанного и перекисного гемолиза эритроцитов 53
2.4.4.3 Определение активности 5-нуклеотидазы в постъядерной фракции печени 53
2.4.4.4 Определение активности фосфолипазы Аг в сыворотке крови 54
2.4.4.5 Определение содержания общих, белковых и небелковых сульфгидрильных (SH-) групп в гомогенате печени 54
2.4.5 Оценка активности ферментов микросомальной системы печени 54
2.4.5.1 Определение N—деметилазной активности 54
2.4.5.2 Определение n-гидроксилазной активности 55
2.4.5.3 Изучение активности оксидоредуктаз с добавлением акцепторов электронов: феррицианида калия, неотетразолия синего 55
2.4.5.4 Определение активности глюкозо - 6 - фосфатазы 55
2.4.6 Оценка интенсивности митохондриальных процессов в печени 56
2.4.6.1 Определение активности сукцинатдегидрогеназы 56
2.4.6.2 Определение активности цитохром-с-оксидазы 56
2.4.6.3 Определение М2+-АТФазной активности 57
2.4.7 Оценка показателей энергетического обмена в печени 57
2.4.7.1 Определение содержания глюкозы в печени 57
2.4.7.2 Определение содержания пировиноградной кислоты в печени 57
2.4.7.3 Определение содержания молочной кислоты в печени 58
2.4.7.4. Определение активности лактатдегидрогеназы в печени 58
2.4.7.5 Определение содержания АТФ в печени 58
2.4.8 Определение содержания NO-радикалов методом ЭПР 58
2.4.9 Выделение постъядерной, микросомальной и митохондриальной фракций печени 59
2.4.10 Определение антиоксидантной активности индивидуальных флавоноидов в модельной системе 60
2.5 Статистическая обработка результатов эксперимента 60
2.6 Используемые реактивы 61
Глава 3 Влияние флавоноидов на развитие окислительного стресса в условиях острого поражения печени тетрахлорметаном 62
3.1 Влияние флавоноидов на интенсивность перекисного окисления липидов и антиоксидантную систему при остром CCU — гепатозе у крыс 62
3.2 Влияние флавоноидов на митохондриальные процессы, микросомальную систему и энергообмен в печени при остром CCU - гепатозе у крыс 72
3.3 Сравнительная оценка гепатозащитной активности флавоноидов при остром ССІ4 - гепатозе 82
Выводы по главе 3 86
Глава 4 Влияние флавоноидов на развитие окислительного стресса при курсовой алкоголизации у крыс 88
4.1 Влияние флавоноидов на биохимические показатели состояния печени, интенсивность перекисного окисления липидов и антиоксидантную систему при курсовой алкоголизации у крыс
4.2 Влияние флавоноидов на митохондриальные процессы, микросомальную систему и энергообмен в печени при курсовой алкоголизации у крыс 100
4.3 Сравнительная оценка гепатозащитной активности флавоноидов при курсовой алкоголизации у крыс 109
Выводы по главе 4 114
Глава 5 Влияние флавоноидов на механизмы, участвующие в развитии окислительного стресса при курсовом введении здоровым животным 116
Выводы по главе 5 128
Глава 6 Изучение антиоксидантного и антирадикального действия гесперидина, диосмина, флавицина и кверцетина 129
Выводы по главе 6 137
Общие выводы 13 8
Список литературы 13 9
