Введение
1. Введение 6
1.1. Актуальность и степень разработанности темы исследования 6
1.2. Цель и задачи работы 10
1.3. Научная новизна работы 10
1.4. Практическая и теоретическая значимость 11
1.5. Положения, выносимые на защиту 11
1.6. Апробация диссертации 12
1.7. Публикации по теме диссертации 12
1.8. Структура и объём диссертации 13
2. Обзор литературы 14
2.1. Морфогенетические потенции 14
2.2. Электромагнитное излучение как действующий на живые объекты фактор 16
2.3. Электромагнитное излучение видимого диапазона 17
2.3.1. История и актуальность изучения воздействия ЭМИ видимого диапазона на живые объекты 17
2.3.2. Действие ЭМИ ВД на процессы развития 18
2.3.3. Действие ЭМИ видимого диапазона на клеточные культуры млекопитающих 19
2.3.4. Первичный акцептор, механизм действия излучения видимого диапазона 20
2.3.5. Ультракороткие лазерные импульсы 23
2.4. Электромагнитное излучение миллиметрового диапазона 25
2.4.1. История и актуальность изучения ЭМИ миллиметрового диапазона 25
2.4.2. Особенности и возможные механизмы действия ЭМИ МД 26
2.4.3. Действие ЭМИ МД на клеточные культуры млекопитающих 27
2.4.4. Онкостатические эффекты ЭМИ МД 29
2.4.5. Отличие действия непрерывного и модулированного (импульсного) излучения .31
3. Материалы и методы 34
3.1. Биологические объекты 34
3.1.1. Эмбриональное развитие вьюна (Misgurnus fossillis) 34
3.1.2. Клеточные культуры теплокровных 34
3.2. Источники электромагнитного излучения 34
3.2.1. Генераторы ЭМИ видимого диапазона .34
3.2.2. Ультракороткие лазерные импульсы .35
3.2.3. Электромагнитное излучение миллиметрового диапазона 35
3.3. Постановка экспериментов по изучению действия ЭМИ на раннее развитие вьюна 36
3.3.1. Подготовка биологического материала к эксперименту 36
3.3.2. Облучение икры вьюна диодным лазером (длина волны 660 нм, плотность мощности 0,02 мВт/см2) 37
3.3.3. Воздействие ЭМИ видимого и миллиметрового диапазона на эмбриональное развитие вьюна 38
3.4. Постановка экспериментов по изучению действия ЭМИ на клеточные культуры млекопитающих 39
3.4.1. Стерильные работы с клеточными культурами 39
3.4.2. Подготовка клеточных культур к эксперименту 40
3.4.3. Воздействие ЭМИ миллиметрового диапазона на клеточные культуры млекопитающих .40
3.4.4. Воздействие фемтосекундных лазерных импульсов на клеточные культуры млекопитающих 41
3.5. Методы исследования воздействия ЭМИ на раннее развитие вьюна (Misgurnis fossillis) 42
3.5.1. Подсчёт числа живых эмбрионов .43
3.5.2. Определение темпов развития эмбрионов .43
3.5.3. Определение длины тела личинок
3.6. Методы исследования воздействия ЭМИ на клеточные культуры млекопитающих 45
3.6.1. Подсчёт числа клеток после облучения (цитометрия) 45
3.6.2. Цитохимическое и иммуноцитохимическое окрашивание .45
3.6.4. Определение митотического и апоптотического индексов 46
3.7. Регистрация физических и химических параметров ростовой среды,
облучённой ультракороткими лазерными импульсами 47
3.7.1. Оценка концентрации активных форм кислорода в культуральной
среде 47
3.7.2. Гидроакустическое исследование среды 47
3.8. Статистическая обработка 48
4. Результаты и обсуждение 49
4.1. Воздействие лазерного излучения 660 нм на раннее развитие вьюна .49
4.1.1. Определение числа живых эмбрионов .49
4.1.2. Определение темпов развития 50
4.1.3. Измерение длины тела личинок 52
4.1.4. Анализ и обсуждение влияния излучения с длиной волны 660 нм на эмбриональное развития вьюна 54
4.2. Воздействие излучений видимого и миллиметрового диапазона на раннее развитие вьюна .54
4.3. Воздействие непрерывного и импульсного ЭМИ миллиметрового диапазона на клеточные культуры млекопитающих .57
4.3.1. Подсчёт числа клеток после облучения в клеточных культурах МСК, HaCaT и HeLa 57
4.3.2. Определение митотического и апоптотического индексов в культуре HeLa после облучения в миллиметровом диапазоне 59
4.3.3. Обсуждение воздействия ЭМИ миллиметрового диапазона на клеточные культуры МСК, HaCaT и HeLa 61
4.4. Действие фемтосекундных лазерных импульсов на клеточные культуры млекопитающих 63 4.4.1. Подсчёт числа клеток HaCaT и МСК после облучения фемтосекундными лазерными импульсами 63
4.4.2. Определение митотического индекса в клеточной культуре HaCaT после облучения фемтосекундными лазерными импульсами 65
4.4.3. Физико-химические исследования среды после облучения фемтосекундными лазерными импульсами 65
4.4.4. Обсуждение результатов воздействия фемтосекундных лазерных импульсов на клеточные культуры HaCaT и МСК
5. Заключение 70
6. Выводы 73
7. Список сокращений 75
8. Список литературы
