Введение
Глава!. CLASS Обзор литературы CLASS 9
1. Общая характеристика внутриклеточного протеолиза 9
1.1. Протеолитические ферменты 10
1.1.1. Сериновые протеиназы И
1.1.2. Цистеиновые (тноловые) протеиназы 12
1.1.2.1. Лизосомальные протеиназы 13
1.1.2.2. Са2+-активируемые нейтральные протеиназы питозоля 16
1.1.3. Аспартильные (карбоксильные) протеиназы 20
1.1.4. Металлопротеиназы 22
1.1.5. Мультикаталитические протеиназы 22
2. Особенности протеолитических ферментов водных организмов и их участие в эколого-биохимических адаптациях 23
3. Влияние загрязнения и сопутствующих факторов среды на водные организмы 26
3.1. Общие положения токсичности... 26
3.2. Влияние промышленных и бытовых сточных вод 32
3.3. Влияние тяжелых металлов 38
3.4. Влияние соединений ртути 41
4. Роль солености окружающей среды для гидробионтов 49
Глава 2. Материал и методы исследований 62
2.1. Материал 62
1.2. Характеристика материала 62
1.3. Методика отбора и хранения биологических проб 63
2.2. Методы исследований 63
2.2.1. Определение стадии зрелости исследуемых организмов 63
2.2.2. Приготовление гомогенатов тканей и экстракция протеиназ 64
2.2.3. Количественное определение водорастворимого белка в тканях 64
2.2.4. Определение активности протеиназ 65
2.2.4.1. Определение активности катепсина В 65
2.2.4.2. Определение активности катепсина D , 65
2.2.4.3. Определение активности Са2+-зависимых нейтральных протеиназ 65
2.2.5. Схема выделения и очистки исследуемых протеиназ 66
2.2.5.1. Разделение белков из тканей исследуемых объектов методом гель-фильтрации на колонках с ультрагелем АсА 34 и сефадексом S-200 66
2.2.5.2. Определение молекулярной массы исследуемых белков методом гель-фильтрации 67
2.2.5.3. Ионообменная хроматография на колонках с ДЭАЭ-целлюлозой.. 68
2.2.5.4. Оценка чистоты препаратов протеиназ методом электрофореза в долиакриламидном геле 68
2.2.6. Статистическая обработка данных 69
Результаты исследований 70
Глава 3. Частичная очистка, распределение, видо-, тканеспецифичность и некоторые физико-химические свойства Са2+-активируемых нейтральных протеиназ гид-робионтов ... 70
3.1.Активность и тканеспецифичность кальпаинов рыб и водных беспозвоночных 71
3.2. Свойства Са2+-зависимых протеиназ из гомогенатов цельных амфипод Gammaridae spp 77
3.3. Свойства Са2+-зависимых протеиназ из эритроцитов форели Salmo trutta L. 80
Глава 4. Влияние антропогенного загрязнения водоемов на внутриклеточный протеолиз у водных организмов 84
4.1. Влияние антропогенного загрязнения прибрежной акватории Белого моря на внутриклеточный протеолиз у амфипод Gammaridae spp. и мидий Mytilus edulish 84
4.2. Влияние стоков горно-обогатительного производства на внутриклеточный протеолиз у щуки Esox lucius и плотвы Rutilus rutilus 91
Глава 5. Влияние соединений ртути на внутриклеточный протеолиз у рыб и млекопитающих .. 97
5.1. Влияние ртутного загрязнения в сочетании с сопутствуюпщми факторами (ацидификация, гумифицированность) на протеолиз в тканях окуня Perca flu-viatilis L. из малых озер Вологодской области и Карелии 97
5.2. Влияние пищевой интоксикации соединениями ртути на внутриклеточный протеолиз у карася Carassius carassius и окуня Perca fluviatilis L. в аквариальных условиях 109
5.3. Влияние пищевой интоксикации солями ртути, различными по растворимости, на внутриклеточный протеолиз в органах крыс и протекторная роль энтеросорбентов 112
Глава 6. Роль солености окружающей среды для водных организмов 119
6.1. Влияние различной солености среды на показатели внутриклеточного протеолиза у мидий Mytilus edulis L. в аквариальных условиях 119
6.2. Влияние солености среды на некоторые показатели белкового обмена у личинок атлантического лосося Salmo satar L 124
6.3. Влияние солености среды на показатели белкового обмена у наваги Elegi-nus navaga Pall 127
Заключение 131
Выводы 134
Используемые сокращения 135
Список литературы 136
Приложение 161
