Введение
1. Введение 5
2. Обзор литературы 7
2.1. Использование полимеров в качестве компонентов лекарственных препаратов 7
2.1.1. Синтетические полимеры как наполнители и материалы для создания препаратов пролонгированного действия 8
2.1.1.1. Иммобилизация лекарств на полимерных носителях 8
2.1.1.2. Получение полиэлектролитных нанокапсул 10
2.1.1.3. Полимерные липосомы 11
2.1.2. Полимеры в конструкциях для направленной доставки лекарств. 14
2.1.3. Полимерные конструкции для направленной доставки доксорубицина. 17
2.1.4. Избирательность, достигаемая введением между лекарством и носителем лабильной развязки, чувствительной к действию определенных протеаз 21
2.1.5. Полимеры как биологически активные вещества. Влияние полимеров на клеточные функции 22
2.1.5.1. Противоопухолевая активность сополимеров на основе малеинового ангидрида 22
2.1.5.2. Блок-сополимеры алкиленоксидов как вещества, влияющие на проницаемость биологических мембран 23
2.2. Взаимодействие полиэлектролитов с противоположно заряженными соединениями 24
2.2.1. Комплексы полиэлектролит-ПАВ. 24
2.2.1.1. Движущие силы комплексообразования полиэлектролитов и ПАВ 25
2.2.1.2. Растворимость комплексов полиэлектролит-ПАВ 26
2.2.1.3. Ассоциация молекул ПАВ на полимерной матрице 27
2.2.1.4. Образование комплексов полиэлектролит - ПАВ в присутствии низкомолекулярного электролита 29
2.2.1.5. Влияние гидрофобности полимера на устойчивость комплексов полиэлектролит-ПАВ 30
2.2.2. Комплексы полиэлектролитов с противоположно заряженными красителями. 32
2.3. Влияние полимеров на структуру и проницаемость мембран 36
2.3.1. Проницаемость биологических мембран 36
2.3.2. Факторы, влияющие па проницаемость липидного бислоя 38
2.3.3. Взаимодействие полианиопов с липосомальными мембранами. 40
2.3.4. Взаимодействие поликатионов с отрицательно заряженными липосомами 43
2.3.4.1. Изменение температуры фазового перехода 43
2.3.4.2. Встраивание поликатионов в липидный бислой 44
2.3.4.3. Изменение проницаемости липидного бислоя 46
2.3.4.4. Латеральная сегрегация в липидном бислое 47
2.3.4.5. Индуцированный поликатионом флип-флоп 48
2.3.4.6. Агрегация липосом 49
2.3.4.7. Слияние липосом 49
2.3.4.8. Разрушение липосом 50
3. Постановка задачи 52
4. Экспериментальная часть 54
4.1. Материалы 54
4.2. Методы 55
4.2.1. Спектральные методы 55
4.2.2. Определение концентрации Доке в растворе 55
4.2.3. Определение концентрации ПАК в растворе 55
4.2.4. Определение степени ионизации ПАК в зависимости отрН. 56
4.2.5. Изучение комплексообразования Доке и ПАК методом центрифугирования 57
4.2.6. Комплексообразование Доке с полиакриловой кислотой в присутствии низкомолекулярной соли. 57
4.2.7. Определение количества связанного с ПАК Доке в зависимости отрН раствора. 58
4.2.8. Определение количества несвязанных компонентов комплекса ПАК-Докс методом ультрафильтрации. 58
4.2.9. Получение малых моноламеллярных липосом 59
4.2.9.1. Получение малых безградиентных липосом 59
4.2.9.2. Получение малых градиентных липосом 59
4.2.10. Метод резонансного переноса энергии 60
4.2.11. Изучение взаимодействия комплексов ПАК-Докс с липосомальной мембраной методом ультрафильтрации. 60
4.2.12. Исследование кинетики проникновения доксорубицина через липосомалъную мембрану. 61
4.2.13. Модификация полиакриловой кислоты алифатическими спиртами 61
4.2.14. Определение критической концентрации мицеллообразования растворов этерифицированных полиакриловых кислот 63
4.2.15. Определение степени модификации ПАК алифатическими спиртами. 63
4.2.16. Электрофорез в полиакриламидном геле 63
4.2.17. Получение больших моноламеллярных липосом 64
5. Влияние полианионов на скорость транспорта доксорубицина через липидную мембрану 65
5.1. Комплексообразование полиакриловой кислоты с доксорубщином 65
5.1.1.1. Условия формирования комплексов 65
5.1.1.2. Определение состава комплекса 71
5.1.1.3. Устойчивость комплексов ПАК-Докс 75
5.1.1.4. Модификация полиакриловой кислоты алифатическими спиртами 78
5.1.2. Взаимодействие комплексов ПАК-Докс с малыми электронейтральными липосомами 81
5.1.2.1. Образование тройных комплексов «ПАК-Докс-Мембрана» 81
5.1.2.2. Изменение структуры комплексов при их взаимодействии с мембранами малых липосом 83
5.1.2.3. Влияние комплексов на проницаемость липосомальных мембран по отношению к малым ионам 87
5.1.2.4. Изменение состава комплексов ПАК-Докс при их взаимодействии с рН-градиентными липосомами 89
5.1.2.5. Исследование скорости мембранного транспорта доксорубицина, включенного в состав комплексов с гидрофобными полианионами 98
5.1.2.6. Комплексообразования ПАК-Докс в присутствии БСА 100
5.1.2.7. Взаимодействие комплексов ПАК-Докс с отрицательно заряэюенными рН- градиентными липосомами при физиологической ионной силе и в присутствии белка 103
5.2. Влияние поликатионов на проникновение доксорубицина через липидный бислой 105
5.2.1. Влияние полилизина на проницаемость мембран больших отрицательно заряженных липосом 106
Выводы 111
