Введение
Обзор литературы 7
1. Клубнеобразование у картофеля 7
2. Факторы, влияющие на процесс клубнеобразования 8
2.1. Факторы окружающей среды (экологические факторы) 8
2.2. Гормоны 10
2.3. Углеводы 16
3. Ферменты углеводного метаболизма 17
3.1. Инвертаза 21
3.2. Сахарозосинтаза 27
3.3. Фруктокиназа, УДФ-глюкозопирофосфорилаза и гексокиназа 31
3.4. АДФ-глюкозопирофосфорилаза 34
3.5. Синтез крахмала 36
3.6. Формирование крахмальных гранул 38
4. Трансгенные растения 43
4.1. Плазмиды агробактерий рода Agrobacterium: Ті- и Ri-плазмиды 44
4.2. Гены го/ 47
Материалы и методы 57
1. Реактивы, использованные в работе 57
2. Объекты 57
3. Выращивание растений in vitro 58
4. Препарирование растений для цитологических исследований 60
5. Определение активности ферментов углеводного метаболизма 61
5.1. Гистохимическое определение локализации активности ферментов углеводного метаболизма in situ 61
5.2. Определение активности ферментов углеводного метаболизма в экстрактах 64
6. Определение содержания цитокининов в микроклубнях картофеля... 65
7. Определение содержания Сахаров в микроклубнях картофеля 66
8. Определение содержания крахмала в микроклубнях картофеля 67
9. Статистическая обработка данных 68
Результаты 69
1. Морфогенетические особенности растений картофеля, содержащих ген дрожжевой инвертазы, rolC- и rolB-гены 69
1.1. Рост в условиях, неблагоприятных для клубнеобразования 69
1.2. Образование клубней в условиях, благоприятных для клубнеобразования 71
2. Анатомическое строение микроклубней контрольных и трансформированных вариантов растений картофеля 73
2.1. Соотношение различных тканей клубня 73
2.2. Исследование крахмальных зерен в микроклубнях трансформированных и контрольных растений 80
2.3. Определение средней площади крахмальных гранул на суспензиях микроклубней 83
3. Влияние трансгенов rolC, rolB и inv на углеводный метаболизм растений картофеля 86
3.1. Гистохимическое определение локализации активности ферментов углеводного метаболизма в стеблях растений картофеля разных генотипов... 86
3.2. Гистохимическое определение локализации активности ферментов углеводного метаболизма в микроклубнях картофеля разных генотипов 93
3.3. Определение активности сахарозосинтазы и инвертазы в экстрактах микроклубней различных генотипов растений картофеля 101
3.4. Содержание моно- и дисахаридов в микроклубнях растений картофеля различных генотипов 108
3.5. Содержание крахмала в микроклубнях растений картофеля различных генотипов 112
4. Содержание цитокининов в микроклубнях контрольных и трансформированных rolC-, rolB- и /wv-генами растений картофеля 115
Обсуждение 119
Заключение 137
Выводы 139
Список цитируемой литературы 142
