Введение
Глава 1. Обзор литературы 11
1.1 Общая характеристика тимуса 11
1.2 Основные формы взаимодействий эпителиальных клеток и тимоцитов 14
1.2.1 Роль эпителиальных клеток в процессе миграции тимоцитов внутри тимуса 14
1.2.2 Адгезия тимоцитов к эпителиальным клеткам тимуса 15
1.2.3 Роль эпителиальных клеток в пролиферации и апоптозе тимоцитов 17
1.3 Функционирование тимуса организме 19
1.3.1 Роль эпителия в механизмах инволюции тимуса 21
1.3.2 Терапия для восстановления вилочковой железы 24
1.4 Семафорин 3А 26
1.4.1 Общая характеристика и строение 26
1.4.2 Рецепторы 28
1.4.3 Функции семафорина 3А 30
1.4.4 Семафорин 3А в иммунной системе 31
Глава 2. Материалы и методы 34
2.1 Животные 34
2.2 Клеточные линии 34
2.3 Изучение адгезии тимоцитов к эпителиальным клеткам тимуса мыши 35
2.4 Исследование пролиферативной активности клеток 36
2.5 Изучение апоптоза тимоцитов методом проточной цитометрии 38
2.6 Определение фенотипа клеток с помощью метода проточной цитометрии 38
2.7 Исследование экспрессии мРНК семафорина 3А, ростовых факторов и их рецепторов с помощью метода ОТ-ПЦР 39
2.8 Изучение структуры актинового цитоскелета 43
2.9 Выделение белка 44
2.10 Иммуноферментный анализ (ИФА) 44
2.11 Статистический анализ 45
Глава 3. Результаты 46
3.1 Характеристика линий эпителиальных клеток тимуса мыши 46
3.2 Синтез рецепторов семафорина 3A клеточными линиями эпителия тимуса и тимоцитами интактных мышей 49
3.3 Изучение пролиферативной активности клеточных линий эпителия тимуса мыши 54
3.3.1 Влияние семафорина 3A на пролиферативную активность эпителиальных клеток тимуса 54
3.3.2 Изучение способности семафорина 3A в комбинации с другими факторами влиять на пролиферативную активность эпителиальных клеток тимуса 56
3.4 Влияние семафорина 3A на функции тимоцитов интактных мышей in vitro 58
3.4.1 Разработка модели адгезии тимоцитов к клеточным линиям эпителия тимуса мыши 58
3.4.2 Влияние семафорина 3A на адгезию тимоцитов интактных мышей к клеточным линиям эпителия тимуса мыши 67
3.4.3 Влияние семафорина 3A на пролиферативную активность тимоцитов интактных мышей 74
3.4.4 Влияние семафорина 3А на клеточную гибель тимоцитов (апоптоз, некроз) 75
3.5 Влияние семафорина 3A на функции тимоцитов, полученных от мышей с гепатомой 22а 78
3.5.1 Влияние опухолевого роста на пролиферативную активность тимоцитов 79
3.5.2 Влияние опухолевого роста на адгезию тимоцитов к клеточным линиям эпителия тимуса мыши 81
3.5.3 Влияние опухолевого роста на синтез семафорина 3А и его рецепторов в тимоцитах мыши 83
Заключение 89
Выводы 101
Список сокращений 102
Список используемой литературы 104
