Введение
Глава 1. Взаимодействие лейкоцитов и семенной жидкости в женском репродуктивном тракте (обзор литературы) 13
1.1. Проблема бесплодия. Мужской фактор в развитии бесплодия 13
1.2. Изучение параметров семенной жидкости 15
1.2.1. Фрагментация ДНК сперматозоидов 16
1.3. Особенности взаимодействия нейтрофилов и семенной жидкости 19
1.3.1. Протективные функции нейтрофилов 20
1.3.2. Влияние семенной жидкости на нейтрофильные гранулоциты 23
1.4. ДНКазная активность семенной жидкости 25
Глава 2. Материалы и методы 29
2.1 Объекты исследования 29
2.2. Забор материала 31
2.2.1. Получение цельной периферической крови 31
2.2.2. Получение чистой фракции нейтрофилов 32
2.2.2.1. Активация нейтрофилов, выделенных из периферической крови женщин, пирогеналом 32
2.2.3. Получение семенной жидкости 33
2.2.4. Получение фракций семенной жидкости
2.5. Спермиологический анализ семенной жидкости 33
2.6. Количественное определение концентрации ДНКазы I семенной жидкости 34
2.7. Определение индекса фрагментации ДНК сперматозоидов мужчин 36
2.8. Иммунологические методы исследования 38
2.8.1. Определение лизосомальной активности нейтрофилов, выделенных из
периферической крови 38
2.8.2. Оценка внутриклеточного кислородзависимого метаболизма
нейтрофилов, выделенных из периферической крови, с помощью НСТ-теста 39
2.8.3. Исследование фагоцитарной активности нейтрофилов, выделенных из периферической крови, с помощью световой микроскопии 40
2.8.4. Обнаружение нейтрофильных внеклеточных ловушек при окраске акридиновым оранжевым 40
2.9. Молекулярно-биологические методы исследования 42
2.10. Методы статистической обработки результатов 43
Глава 3. Изучение показателей семенной жидкости у мужчин репродуктивного возраста 45
3.1. Анализ показателей стандартной спермограммы 45
3.2. Определение концентрации ДНКазы I семенной жидкости 47
3.3. Определение уровня фрагментации ДНК сперматозоидов 48
Глава 4. Влияние семенной жидкости и ее компонентов на функциональную активность интактных и индуцированных нейтрофилов, выделенных из периферической крови 52
Глава 5. Влияние семенной жидкости, имеющей отклонения в показателях спермограммы, на функциональную активность нейтрофилов, выделенных из периферической крови 61
5.1. Влияние семенной жидкости, характеризующейся повышенной вязкостью на функциональную активность нейтрофилов, выделенных из периферической крови. 62
5.2. Влияние клеточных элементов эякулята, характеризующегося повышенной вязкостью, на функциональную активность нейтрофилов, выделенных из периферической крови 67
5.3. Влияние надосадочной жидкости, полученной из эякулята, характеризующегося повышенной вязкостью, на функциональную активность нейтрофилов, выделенных из периферической крови 71
5.4. Влияние семенной жидкости, характеризующейся лейкоцитоспермией, на функциональную активность нейтрофилов, выделенных из периферической крови .77
5.5. Влияние клеточных элементов эякулята, характеризующегося лейкоцитоспермией, на функциональную активность нейтрофилов, выделенных из периферической крови 81
5.6. Влияние надосадочной жидкости, полученной из эякулята, характеризующегося лейкоцитоспермией, на функциональную активность нейтрофилов, выделенных из периферической крови 85
5.7. Влияние семенной жидкости на функциональную активность нейтрофилов, выделенных из периферической крови, в зависимости от концентрации ДНКазы эякулята 89
5.8. Влияние клеточных элементов эякулята на функциональную активность нейтрофилов, выделенных из периферической крови, в зависимости от концентрации ДНКазы I семенной жидкости 95
5.9. Влияние надосадочной жидкости на функциональную активность нейтрофилов, выделенных из периферической крови, в зависимости отконцентрации ДНКазы I семенной жидкости 100
Заключение 106
Выводы 128
Список сокращений и условных обозначений 130
Список литературы
