Введение
2. Обзор литературы 6
2.1. Основные физико-химические свойства плюроников 6
2.2. Искусственные липидные бислои и взаимодействие плюроников с ними 8
2.3. Влияние синтетических соединений нафлип-флоп липидов 12
2.4. Влияние полимеров на проницаемость мембран 19
2.5. Применение плюроников в медицине 26
2.6. Множественная лекарственная устойчивость опухолевых клеток и способы ее преодоления 27
2.6.1. Основные механизмы множественной лекарственной устойчивости 28
2.6.2. Строение и механизм действия Р-гликопротеина 30
2.6.3. Использование плюроников для подавления МЛУ 33
2.7. Синтез и физико-химические свойства полиглицеринов 40
3. Постановка задачи 43
Экспериментальная часть 45
4. Материалы и методы 45
4.1. Определение концентрации полимеров 46
4.2. Определение коэффициента распределения полимеров в системе н-гексан - вода 47
4.3. Кинетика проникновения доксорубицина в липосомы с градиентом рН 47
4.4. Измерение скорости флип-флопа липидов в липосомальных мембранах 49
4.5 Культивирование клеток 52
4.6. Определение белка 53
4.7. Электрофорез в полиакриламидном геле и иммуноблоттинг 53
4.8. Определение цитотоксичности доксорубицина и полимеров 54
4.9. Влияние полимеров на цитотоксичность доксорубицина 55
4.10. Исследование клеток методом конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (КЛСМ) 56
4.11. Изучение выброса доксорубицина из клеток K562/DOX методом спектрофлуорометрии 57
4.12. Связывание 3Н-меченых полимеров с клетками K562/DOX 58
5. Результаты и их обсуждение 59
5.1. Взаимодействие синтетических полимеров с модельными липидными мембранами 59
5.1.1. Влияние синтетических блок-сополимеров на скорость трансбислойной миграции липидов (флип-флоп) 59
5.1.2. Влияние синтетических блок-сополимеров на проницаемость модельной липидной мембраны 75
5.2. Взаимодействие синтетических полимеров с клетками 79
5.2.1. Характеристика клеток 80
5.2.2. Цитотоксичность полимеров 84
5.2.3. Влияние полимеров на токсичность доксорубицина 87
5.2.4. Влияние полимеров на внутриклеточное накопление доксорубицина 93
5.2.5. Влияние полимеров на выброс доксорубицина из клеток 97
Выводы 103
Список сокращений 104
Список цитируемой литературы
