Введение
I. Введение З
II. Обзор литературных данных 7
ІІ.1. Введение 7
П.2. Антибактериальные эффекты ионов серебра 8
11.2,1. Механизмы действия ионов серебра 8
П.2.2. Резистентность к ионам серебра 11
Действие наночастиц серебра 13
11.3.1. Механизмы действия НЧС 14
на ингибирование наночастицами микроорганизмов при облучении светом 19
П.4.1. Фотокаталитический механизм 19
II. 4.2. Фототермальный эффект 27
11.5. Синтез наночастиц 29
П.5.1. Биосинтез паночастиц с использованием бактерий 30
11.6. Заключение 45
III. Материалы и методы 47
ПІЛ. Среды и условия культивирования бактерий Exoli, Pseudomonas, Serratia 47
Ш.2. Штаммы, плазмиды и олигонуклеотиды 47
Ш.З. Используемые наночастицы серебра, ионы серебра и золота 50
III.4. Определение минимальных ингибирующих концентраций (МИК) 50
Ш.5. Кинетика роста Е. coli АВ1157 в присутствии наночастиц серебра 51
III.6. Определение образования биопленок 51
Ш.7. Влияние соединений серебра и золота на деградацию зрелых биопленок 52
111.8. Определение живых и мертвых клеток в составе биопленок 52
111.9. Влияние соединений серебра и золота на выживаемость клеток бактерий в стационарной и логарифмической фазах роста, а также в аэробных и анаэробных условиях роста 53
ШЛО. Передача плазмид рМЕ6863 и рМЕбООО 53
ПІЛ 1. ПЦР — амплификация 54
III. 12. Электрофорез фрагментов ДНК в агарозном геле 54
111.13. Определение продукции АГЛ 55
III. 14. Условия получения наночастиц золота для оптоперфорации клеточной стенки Anabaenasp.PCClUO 55
111.15. Оптоперфорация клеточной стенки цианобактерий и биопленок бактерий Е. coli 55
111.16. Биогенез наночастиц серебра и золота 56
і III.17. Спектрофотометрия суспензии клеток с наночастицами серебра и золота 57
III. 18. Электронная микроскопия 57
IV. Результаты 58
IV. 1. Изучение действия ионов и наночастиц серебра на клетки бактерий 58
IV.1.1. Влияние ионов и наночастиц серебра па рост бактерий 59
IV. 1.2. Действие ионов и наночастиц серебра на формирование биопленок бактериями 61
IV. 1.3. Влияние НЧС на деградацию биопленок бактерий и гибель клеток в них .63
IV. 1.4. Изучение механизмов повышенной резистентности биопленок E.coli к действию ионов и наночастиц серебра 65
IV. 1.5. Чувствительность к серебру клеток Е. coli с мутациями в генах, участвующих в репарации ДНК, глобальной регуляции экспрессии генов бактерий, синтезе транспортных белков поринов 67
IV. 1.6. Quorum Sensing регуляция и действие ионов и наночастиц серебра на бактерии 72
IV.2. Изучение действия ионов и наночастиц золота на клетки бактерий 74
IV.2.1. Влияние ионов золота на рост бактерий 74
W.2.2. Действие ионов золота на формирование биопленок бактериями 75
W.2.3. Влияние ионов золота на деградацию биопленок бактерий и гибель клеток в них 76
IV.2.4. Изучение механизмов повышенной резистентности биопленок E.coli к действию ионов золота 78
W.2.5. Чувствительность к ионам золота клеток Е. coli с мутациями в генах, участвующих в глобальной регуляции экспрессии генов бактерий, репарации ДНК, синтезе транспортных белков поринов 79
IV.2.6. Влияние наночастиц золота нарост бактерий 81
IV.3. Фемтосекундная оптоперфорация стенки цианобактерий Anabaena sp. РСС 7120
wtB присутствии наночастиц золота 81
IV.4. Разработка метода разрушения биопленок с помощью лазерного облучения наночастиц золота 85
IV.5. Получение наночастиц металлов биологическими способами 87
V. Обсуждение результатов 92
VI. Выводы
VII. Список литературы 101
VIII. Благодарности 119
