Введение
Глава 1. Современные представления о листериозе 17
1.1. Краткий исторический очерк изучения возбудителя листериоза 17
1.2. Эколого-эпидемические аспекты листериоза 18
1.3. Микробиология листериоза 30
1.4. Факторы патогенности L.monocytogenes и их участие в развитии инфекционного процесса 38
1.4.1. Факторы патогенности L.monocytogenes, участвующие в адгезии, инвазии эукариотических клеток и внутриклеточном выживании 38
1.4.2. Продукция бактериальных экзоферментов и их вклад в инфекционный процесс 48
1.5. Молекулярно-генетическая организация листерий 52
1.6. Клинико-патогенетические особенности листериоза 59
1.6.1. Патогенез листериозной инфекции 59
1.6.2. Клинические варианты листериозной инфекции 63
Собственные исследования 72
Глава 2. Материал и методы 72
2.1. Материалы 72
2.1.1. Материал 72
2.1.2. Микроорганизмы 72
2.1.3 Животные 76
2.1.4. Среды для культивирования и идентификации бактерий 76
2.1.5. Аппаратура 78
2.2. Методы исследования 79
2.2.1. Микробиологические методы 79
2.2.2. Молекулярно-генетические методы 82
2.2.3. Статистические методы 89
Глава 3. Биологические свойства листерий, изолированных на Дальнем Востоке 97
3.1. Подбор оптимальных питательных сред, схемы выделения, культивирования и изучения биологических свойств листерий 97
3.2. Микробиологическая характеристика листерий, изолированных в Дальневосточном регионе 110
3.2.1. Микробиологическая характеристика листерий, изолированных из биотических объектов 110
3.2.2, Микробиологическая характеристика листерий, изолированных из абиотических объектов 114
3.3.Сравнительный анализ микробиологических свойств L.monocytogenes, изолированных на Дальнем Востоке и в Европей ской части России 118
3.4. Факторы патогенности у L.monocytogenes, выделенных на Дальнем Востоке 121
3.5. Гены патогенности у L. monocytogenes, выделенных на Дальнем Востоке 124
3.6. Сравнительный анализ патогенных свойств L.monocytogenes, выделенных на Дальнем Востоке и в Европейской части России 127
3.7. Антибиотикорезистентность культур L.monocytogenes, выделенных в различных регионах России (Дальнем Востоке и Европейской части) 132
Глава 4. Генетическая вариабельность штаммов L.monocytogenes, изолированных на Дальнем Востоке России 139
4.1. Спектр генов, кодирующих белки - интерналины у L.monocytogenes 139
4.2. Полиморфизм гена общего метаболизма prs у L.monocytogenes 145
4.3. Сравнительный анализ полиморфизма генов, кодирующих белки интерналины (inlA, inlB, inlC, inlE), и гєна. prs у штаммов monocytogenes, изолированных в Дальневосточном регионе и в Европейской части России 152
4.3.1. Структура гена inlB у дальневосточных изолятов L.monocytogenes 159
Глава 5. Филогенетическая характеристика популяции L.monocytogenes, распространенной на Дальнем Востоке Российской Федерации 167
5.1. Серологическая принадлежность изолятов L.monocytogenes, выделенных на Дальнем Востоке 167
5.2. Фаготипическая принадлежность штаммов L.monocytogenes 173
5.3. Новая система типирования на основании полиморфизма пяти маркерных генов: inlA, MB, inlC, inlE, prs для анализа филогенети ческого положения изолятов L. monocytogenes 176
5.4. Анализ филогенетической принадлежности изолятов L.monocytogenes в зависимости от региона и источника выделения 181
5.4.1. Анализ специфичности филогенетического положения изолятов L.monocytogenes в зависимости от региона выделения 181
5.4.2. Анализ специфичности филогенетического положения изолятов L.monocytogenes и распределения аллелей генов, кодирующих белки-интерналины, в зависимости от источника выделения 183
5.4.3. Анализ аминокислотных замен у изолятов L.monocytogenes, связанный с филогенетическим происхождением и источником выделения 187
5.5. Анализ филогенетического положения изолятов L. monocytogenes, полученных от беременных женщин и мертворожденных плодов на Дальнем Востоке России 190
5.5.1. Филогенетическое разделение среди клинических изолятов L.monocytogenes 191
5.5.2. Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей фрагментов генов inlA, inlB nprs у изолятов L. monocytogenes 196
5.5.3. Анализ вариабельности генов инвазии и гена общего метаболизма у клинических изолятов L. monocytogenes внутри филогенетических линий 198
Глава 6. Влияние абиотических факторов на вирулентность штаммов L.monocytogenes 202
6.1. Изменение адгезивных свойств бактерий рода Listeria под влиянием абиотических факторов 203
6.1.1. Изменение адгезивных свойств листерий под влияние температуры 204
6.1.2. Изменение адгезивных свойств листерий под влияние рН среды 210
6.1.3. Изменение адгезивных свойств листерий под влияние экзогенной нуклеиновой кислоты 215
Заключение 221
Выводы 250
Рекомендации для внедрения результатов исследования 252
Список литературы 255
