Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 11
1.1 Азоспириллы – ризобактерии, стимулирующие рост высших растений 11
1.1.1 Экологическиe и физиологические особенности представителей рода Azospirillum 12
1.1.2 Стресс у азоспирилл и других бактерий 17
1.1.3 Биопленки у A. brasilense 28
1.2 Покой как особое физиологическое состояние у бактерий 32
1.2.1 Формирование и поддержание покоя 32
1.2.2 Индукция выхода бактерий из состояния покоя 37
1.3 Агглютинин зародышей пшеницы (АЗП): строение, свойства и функции в биологических системах. 40
1.3.1 Строение, свойства и локализация АЗП в растениях пшеницы 41
1.3.2 АЗП как БАВ в растениях и других эукариотических организмах 43
1.3.3 Влияние АЗП на A. brasilense 45
1.4 Ростстимулирующие ризобактерии – основа биопрепаратов для современного растениеводства 50
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследований 57
2.1 Бактерии и условия их культивирования 57
2.2 Оценка числа жизнеспособных клеток 59
2.3 Оптические параметры роста азоспирилл 59
2.4 Получение культур A.brasilense разной глубины покоя 59
2.5 Световая и электронная микроскопия 62
2.6 Рентгенодифракционный анализ биопленок и клеток A. brasilense Sp245 64
2.7 Приготовление образцов для ИК-фурье-спектроскопии 65
2.8 ИК-фурье-спектроскопия в режиме диффузного отражения.. 65
2.9 Получение экстрактов АЗП для реакции гемагглютинации (РГА) и иммуноферментного анализа (ИФА) 66
2.10 Оценка содержания АЗП в зерновках пшеницы методом РГА 67
2.11 Двойная радиальная иммунодиффузия 68
2.12 Определение содержания АЗП в семенах пшеницы методом непрямого конкурентного ИФА 69
2.13 Оценка качества зерна методом SDS-седиментации 70
2.14 Микробные обработки семян и растений пшеницы 71
2.15 Проведение полевых экспериментов 72
2.16 Статистическая обработка результатов 74
ГЛАВА 3. Результаты исследований и их обсуждение 75
3.1 Принципы получения покоящихся культур A. brasilense двух типов 75
3.2 Получение покоящихся форм A. brasilense в естественном цикле старения 76
3.2.1 Культура длительного хранения, заложенная в оптималь ных условиях: получение и частичная характеристика 77
3.2.2 Особенности старения A. brasilense в неоптимальных условиях 81
3.3 Реакция A. brasilense на стрессовые факторы и индукция покоя под действием стресса 82
3.3.1 Влияние кобальта и меди на рост A. brasilense 82
3.3.2 Влияние различных форм меди на рост A. brasilense 83
3.3.3 Гексилрезорцин – адаптоген и ингибитор размножения азоспирилл 86
3.3.4 Реакция A. brasilense на жесткий трофический стресс 88
3.3.5 A. brasilense Sp245 в условиях комплексного стресса 90
3.4 Особенности персистенции азоспирилл 95
3.4.1 Биопленки в жидких культурах A. brasilense 95
3.4.1.1 Рентгенографический анализ флокулосодержащей биопленки 105
3.4.1.2 Исследование флокулосодержащей биопленки методом ИК-фурье-спектроскопии
3.4.2 Кристаллообразование в покоящихся культурах азоспи-риллы 114
3.4.3 Фенотипическая диссоциация у A. brasilense Sp245 и SR75
3.5 Стимуляция перехода A. brasilense от покоя к размножению под действием АЗП 123
3.6 Скрининг сортов пшеницы по признаку «содержание АЗП». 133
3.7 Агробиотехнологический потенциал A. brasilense в зоне рискованного земледелия
3.7.1 Увеличение урожайности и продуктивной кустистости у яровой мягкой пшеницы под влиянием бактерий A. brasilense 139
3.7.2 Влияние предпосевной обработки семян пшеницы азоспириллами на качество зерна нового урожая 145
Заключение 153
Выводы 161
Список сокращений и пояснений 163
Список использованной литературы
