Введение
Глава 1. Обзор литературы 15
1.1. Старение. Теории старения 15
1.2. Старение нейронов (головного мозга, неокортекс) 21
1.3. Строение коры мозга и ее функции в норме .22
1.4. Структурные изменения коры при старении 27
1.5. Апоптоз .28
1.5.1. Активация апоптоза .30
1.5.2. Апоптоз. Внешний сигнальный путь .31
1.5.3. Апоптоз. Внутренний сигнальный путь .32
1.5.4. Третий, внутренний путь апоптоза с участием эндоплазматической сети 33
1.6. Регуляторы апоптоза 34
1.7. Роль апоптоза в процессе старения 36
1.8. Развитие нейродегенеративных заболеваний 38
1.8.1. Болезнь Альцгеймера 38
1.8.2. Болезнь Паркинсона .40
1.8.3. Болезнь Хантингтона 41
1.8.4. Боковой амиотрофический склероз .41
1.9. Модели старения 42
1.10. Рецептор эпидермального фактора роста HER-2/neu .43
1.11. Сигнальный путь PI3К/AKT/mTOR 45
1.12. Сигнальный путь MAPK/ERK .49
1.13. Связь апоптоза и рака .52
Глава 2. Материалы и методы 56
2.1. Экспериментальные модели 56
2.2. Методы 58
2.2.1. Гистологическая обработка материала 58
2.2.2. Метод TUNEL 58
2.2.3. Иммуногистохимический метод 58
2.2.4. Вестерн блоттинг анализ .59
2.2.5. Анализ изображений .61
2.3. Методы, позволяющие исследовать поведенческое состояние и психологический статус экспериментальных животных 62
2.3.1. Тест «открытое поле» .62
2.3.2. Suok-тест 64
2.4. Статистический анализ результатов .65
Глава 3. Результаты 66
3.1. Исследование антиапоптозной активности препаратов 66
3.1.1. Регуляция апоптоза нейронов сенсомоторной коры головного мозга, определяемая с помощью метода TUNEL, у экспериментальных групп мышей разного возраста 66
3.1.2. Изменение уровня апоптоз-ассоциированных белков в клетках сенсомоторной коры головного мозга у экспериментальных разновозрастных групп животных в онтогенезе 70
3.1.2.1. Уровень белка СD95 - члена суперсемейства поверхностно-активных рецепторов TNF и проапоптотического белка caspase-8 в клетках сенсомоторной коры головного мозга у экспериментальных разновозрастных групп животных в онтогенезе 70
3.1.2.2. Уровень белка-супрессора опухолей р53 и проапоптотического белка caspase-3 в клетках сенсомоторной коры головного мозга у экспериментальных разновозрастных групп животных в онтогенезе .74
3.1.2.3. Уровень антиапоптотических белков Mcl-1 и Вcl-2 в клетках сенсомоторной коры головного мозга у экспериментальных разновозрастных групп животных в онтогенезе 77
3.1.2.4. Уровень белков AKT (p-АКТ) и ERK (p-ERK)в клетках сенсомоторной коры головного мозга у экспериментальных разновозрастных групп животных в онтогенезе 80
3.1.2.5. Уровень белка Actin в клетках сенсомоторной коры головного мозга у экспериментальных разновозрастных групп животных в онтогенезе 89
3.2. Анализ результатов локомоторной активности, ориентировочно исследовательского поведения и психоэмоционального статуса у экспериментальных групп мышей разного возраста .90
3.3 Анализ результатов локомоторной активности, ориентировочно исследовательского поведения и психоэмоционального статуса у экспериментальных групп мышей разного возраста под воздействием цитофлавина и пирацетама 95
3.4 Уровень белка HER-2/neu в клетках сенсомоторной коры головного мозга у экспериментальных разновозрастных групп животных в онтогенезе .98
Глава 4. Обсуждение 100
4.1. Исследование механизма программированной смерти нейронов сенсомоторной коры головного мозга у мышей двух генетических линий FVB/N и HER-2/neu на поздних этапах онтогенеза 100
4.1.1. Уровень клеточной смерти нейронов у контрольной группы мышей при физиологическом старении 100
4.1.2. Уровень клеточной смерти нейронов у контрольной группы мышей при сверхэкспрессии HER-2/neu .103
4.2. Исследование механизмов влияния цитофлавина и пирацетама на регуляцию апоптоза у экспериментальных групп мышей при физиологическом старении и при сверхэкспрессии HER-2/neu 105
4.3. Изменения локомоторной активности, ориентировочно-исследовательского поведения и эмоционального состояния у мышей двух генетических линий FVB/N и HER-2/neu при старении 112
4.4. Исследование влияния цитофлавина и пирацетама на локомоторную активность, ориентировочно-исследовательское поведение и эмоциональное состояние мышей двух генетических линий FVB/N и HER-2/neu при старении 114
Заключение .119
Выводы 120
Список сокращений 122
Список использованной литературы .124
Приложение .161
