Введение
Глава 1. Особенности биологии аэробных метилотрофных бактерий 11
Глава 2. Ассоциации аэробных метилотрофов с растениями
2.1. Ассоциация аэробных метилобактерий с растениями 24
2.2. Ассоциация аэробных метанотрофных бактерий с растениями 26
2.3. Влияние метилотрофных бактерий на рост и развитие растений in vivo 31
2.4. Метилотрофные бактерии и азотный метаболизм растений 32
Глава 3. Фитогормоны и другие биоактивные соединения 34
3.1. Цитокинины 35
3.2. Ауксины 40
3.3. Витамин В12 45
3.4. Экзополисахариды 47
3.5. Осмопротекторы 48
Глава 4. Материалы методы 50
4.1. Объекты исследования 50
4.2. Культивирование бактерий 50
4.3. Выделение накопительных и чистых культур метилотрофных бактерий 53
4.4. Электронная микроскопия 54
4.5. Изучение физиолого-биохимических свойств 54
4.6. Определение активности ферментов 54
4.7. Аналитические методы 61
4.7.1. Определение фосфолипидного состава клеток 61
4.7.2. Анализ жирных кислот 62
4.7.3. Определение убихинонов 62
4.8. Выделение и идентификация фитогормонов 62
4.8.1. Экстракция цитокининов и ауксинов 62
4.8.2. Идентификация цитокининов 63
4.8.3. Идентификация ауксинов 64
4.9. Определение содержания витамина Віг 65
4.9.1. Культивирование Е. coli - 113-3 65
4.9.2. Экстракция витамина Вп из клеток 66
4.9.3. Анализ экстрактов на наличие витамина В^ 66
4.10. Молекулярно-генетические методы 66
4.10.1. Выделение ДНК 61
4.10.2. Выделение РНК 67
4.10.3. ПЦР-амплификация и секвенирование гена 16S рРНК 67
4.10.4. ПЦР-амплификация тотальной ДНК накопительных культур метанотрофов 68
4.10.5. ПЦР-амплификация ipt гена 69
4.10.6. Синтез первой цепи кДНК 70
4.10.7. ДНК-ДНК гибридизация 70
4.11. Влияние метилотрофов на рост и морфогенез растений in vitro 70
4.11.1. Растительный материал 70
4.11.2. Среды и растворы 71
4.11.3. Культивирование растений 71
4.11.4, Регенерация растений 72
4.11.5, Инокуляция растений метанотрофами и метилобактериями 72
4.11.6, Анализ растительного материала 73
Глава 5. Биоразнообразие метилотрофных бактерий 76
5.1. Аэробные метилотрофные бактерии, ассоциированные с растениями 76
5.2. Филогенетический анализ метилотрофных изолятов 85
5.3. Локализация аэробных метилотрофных бактерий на/в растительных тканях 87
Глава 6. Идентификация метилотрофов 90
6.1. Морфология и ультраструктура 90
6.2. Культуральные и физиолого-биохимические свойства 90
6.3. Метаболическая характеристика 91
6.4. Состав убихинонов, фосфолипидов и жирных кислот 94
6.5. Генотипические свойства 95
6.6. Таксономическое положение новых изолятов метилобактерий 96
Глава 7. Влияние метилотрофов на рост, морфогенез и регенерацию растений, культивируемых in vitro 98
7.1. Влияние метилобактерий и метанотрофов на прорастание семян льна долгунца и табака in vitro 98
7.2. Влияние метилобактерий и метанотрофов на рост и морфогенез табака и картофеля in vitro 99
7.3. Влияние метилобактерий и метанотрофов на регенерацию табака и льна долгунца in vitro 104
7.4. Влияние метилобактерий и метанотрофов на регенерацию и морфогенез пшеницы in vitro 106
Глава 8. Способность метилотрофов к синтезу фитогормонов и витамина В12 112
8.1. Образование цитокининов 112
8.2. Синтез ауксинов 120
8.3. Образование витамина В 132
Заключение 134
Выводы 136
Литература 137
