ВВЕДЕНИЕ...................................................................................................................... 5
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР......................................................................... 11
1.1 Эубиоз и дисбиоз кишечника................................................................................. 11
1.2 Облигатная микробиота – источник БАВ............................................................. 18
1.3 Грибы рода Trichoderma – продуценты БАВ ....................................................... 20
1.4 Пробиотики для коррекции микробиоценоза кишечника .................................. 25
1.5 Применение пробиотиков в ветеринарной медицине ......................................... 32
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ........................................... 35
2.1 Объекты исследования ........................................................................................... 35
2.2 Реактивы и расходные материалы......................................................................... 35
2.3 Оборудование .......................................................................................................... 36
2.4 Методы исследования............................................................................................. 37
ГЛАВА 3. ОБОСНОВАНИЕ ВЫБОРА ПРОДУЦЕНТА
БАКТЕРИОСТАТИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ ....................................... 46
3.1 Скрининг антагонистически активных штаммов Trichoderma spp.................... 46
3.2 Биологические свойства перспективного штамма-продуцента ......................... 48
3.2.1 Молекулярно-генетическая идентификация ..................................................... 48
3.2.2 Культуральные и морфологические свойства................................................... 50
3.2.3 Биохимические свойства .................................................................................... 53
3.3 Подбор условий культивирования T. atrobrunneum ВКПМ F-1434................... 55
3.3.1 Исключающий эксперимент ............................................................................... 55
3.3.2 Выбор субстрата................................................................................................... 60
3.4 Подбор условий экстракции БАВ T. atrobrunneum ВКПМ F-1434.................... 65
3.4.1 Выбор источника БАВ......................................................................................... 65
3.4.2 Выбор экстрагента и условий извлечения БАВ из культуральной жидкости
T. atrobrunneum ВКПМ F-1434 .................................................................. 67
3.5 Получение, изучение свойств и состава экстракта культуральной жидкости
T. atrobrunneum ВКПМ F-1434 .................................................................. 69
3.5.1 Извлечение БАВ экстракта культуральной жидкости T. atrobrunneum ВКПМ
F-1434 ........................................................................................................... 69
3.5.2 Физические, химические и биологические свойства экстракта культуральной
жидкости T. atrobrunneum ВКПМ F-1434 ................................................ 70
3.5.4 Анализ состава экстракта культуральной жидкости T. atrobrunneum ВКПМ
F-1434 ........................................................................................................... 74
3.6 Оптимизация условий глубинного культивирования T. atrobrunneum ВКПМ F1434............................................................................................................... 80
3.6.1 Определение математической модели процесса культивирования ................ 80
3.6.2 Установление экстремального отклика методом крутого восхождения........ 84
4
ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ БИОПРОДУКЦИИ НА
ОСНОВЕ ЭКСТРАКТА КУЛЬТУРАЛЬНОЙ ЖИДКОСТИ T.
ATROBRUNNEUM ВКПМ F-1434 ............................................................. 87
4.1 Конструирование бактериостатической композиции на основе экстракта
культуральной жидкости T. atrobrunneum ВКПМ F-1434...................... 87
4.1.1 Технология получения бактериостатической композиции ............................. 89
4.1.2 Оценка безвредности бактериостатической композии .................................... 95
4.1.3 Оценка влияния бактериостатической композиции на эффективность βлактамных антибиотиков ........................................................................... 99
4.1.4 Критерии подлиности экстракта культуральной жидкости T. atrobrunneum
ВКПМ F-1434 ............................................................................................ 100
4.2 Конструирование метабиотика на основе бактериостатической композиции101
4.2.1 Обоснование выбора компонентов метабиотика............................................ 101
4.2.1 Технология получения метабиотика для коррекции микробиоценоза
кишечника.................................................................................................. 103
4.3 Метод определения массовой доли экстракта культуральной жидкости T.
atrobrunneum ВКПМ F-1434 в биопродукции........................................ 114
4.4 Экспериментальное подтверждение коррекции микробиоценоза кишечника в
опыте in vivo............................................................................................... 117
ВЫВОДЫ..................................................................................................................... 121
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ........................................................................................... 124
ПРИЛОЖЕНИЯ........................................................................................................... 152
