Введение
1. Обзор литературы
1.1. Состав и структура хроматина. 7
1.2. Негистоновые белки хроматина 9
1.3. Основные белки хроматина - гистоны 10
1.4. Антигенные свойства белков в составе хроматина 19
1.5. Антигенная специфичность гистонов 22
1.6. Заключение 25
2. Материал и методы исследования
2.1. Характеристика материала 27
2.2. Выделение и фракционирование хроматина 28
2.1.1. Выделение хроматина
2.2.1. Фракционирование хроматина ультрацентрифугированием 29
2.2.2. Выделение дезоксирибонуклеопротеида (ДНП) 29
2.2.3. Выделение суммарного гистона 30
2.3. Фракционирование гистонов
2.3.1. Фракционирование гистонов последовательным экстрагированием 30
2.3.2. Ионообменная хроматография гистонов на КМ-целлюлозе 31
2.3.3. Гель-фильтрация гистонов на биогеле Р-60 32
2.4. Иммунохимические методы
2.4.1. Получение иммунных сывороток.. 35
2.4.2. Двойная иммунодиффузия в геле 35
2.5. Электрофоретические методы
2.5.1. ДЦС-электрофорез белков хроматина 3?
2.5.2. Электрофорез белков хроматина в НААГе в присутствии цетавлона 38
2.5.3. Электрофорез гистонов в ПААГе 39
2.5.4. Двумерный электрофорез гистонов в ПААГе.. 41
2.5.5. Идентификация гистонов на электрофореграммах 43
2.6. Заключение 47
3. Результаты исследования
3.1. Антигенные свойства хроматина бобовых 49
3.2. Антигенные свойства гистонов и негистоновых белков в составе хроматина бобовых 56
3.3. Антигенные свойства и специфичность очищенных фракций гистонов бобовых 73
3.4. Сравнительный иммунохимический анализ гистонов бобовых и злаков 80
3.5. Гетерогенность гистонов бобовых и злаков (по данным электрофоре тиче ского анализа) 83
4. Обсуждение результатов
4.1. Антигенные свойства и гетерогенность гистонов бобовых 103
4.2. Специфичность антигенных детерминант белков хроматина бобовых 114
Выводы 119
Практические рекомендации 120
Литература 121
