Введение
Глава 1. Обзор литературы 12
1.1. Перспективы использования культуры тканей растений в биохимии и биотехнологии 12
1.2. Введение в культуру тканей Polyscias filicifolia 17
1.3. Германийорганические соединения: биологическая активность, применение в медицине 19
1.4. Метаболизм белка в растениях 26
1.4.1. Обмен белка в растительных клетках 26
1.4.2. Кругооборот белка у растений при температурном воздействии 32
Глава 2. Материалы и методы исследования 44
2.1. Объект исследования и метод культивирования ткани 44
2.2. Выделение цитозольной фракции из культивируемых клеток 44
2.3. Энзиматические методы 45
2.3.1 Определение активности каталазы 45
2.3.2. Определение активности пероксидазы 45
2.3.3. Определение активности супероксиддисмутазы (СОД) 46
2.4. Определение германия в клетках полисциас LX-5 46
2.5. Количественный анализ нуклеиновых кислот 47
2.6. Определение содержания карбонильных групп в белках 48
2.7. Оценка степени фрагментации окисленных белков 49
2.8. Определение железо-зависимого образования битирозина 50
2.9. Электрофоретические методы 51 2.9Л. Диск-электрофорез в ПААГ 51
2.9.2. Электрофорез в 10 % ПААГ с DS-Na 51
2.10. Радиоизотопные методы 52
2.10.1.Определение параметров обмена общего белка в клетках культуры ткани, выращенной на стандартной и обогащенной германийорганическим соединением средах 52
2.10.2. Изучение влияния температурного шока на обмен общего белка 52
2.11. Аналитические методы 53
2.12. Статистическая обработка результатов эксперимента 54
Глава 3. Результаты экспериментов 55
3.1. Обмен внутриклеточного белка в культурах ткани полисциас Polyscias filicifolia и Polyscias filicifolia LX-5, выращенных в стандартных условиях культивирования 55
3.1.1. Динамика прироста биомассы и общего белка в культуре ткани Polyscias filicifolia и Polyscias filicifolia LX-5 55
3.1.2. Параметры кругооборота внутриклеточного белка в культуре ткани Polyscias filicifolia и Polyscias filicifolia LX-5 58
3.1.3.Количественное содержание нуклеиновых кислот в культуре ткани Polyscias filicifolia и Polyscias filicifolia LX-5 59
3.1.4. Оценка антиоксидантного и прооксидантного статуса культуры ткани Polyscias filicifolia и Polyscias filicifolia LX-5 61
3.1.5. Оценка протеинового спектра внутриклеточных белков в клетках культур ткани Polyscias filicifolia и Polyscias filicifolia LX-5 66
3.1.6. Фотохимический анализ культуры ткани Полисциас 68
3.2. Биохимическая оценка метаболизма общего белка в культуры ткани полисциас Polyscias filicifolia и Polyscias filicifolia LX-5 в условиях высоко- и низкотемпературного шоков 70
3.2.1. Динамика содержания общего белка и параметры кругооборота в культуре ткани исходного и селективного штаммов полисциас при воздействии теплового шока и низких температур 70
3.2.2. Исследование протеиновых спектров вігутриклеточньїх белков в клетках культуры ткани полисциас при воздействии теплового шока и низких положительных температур 74
3.2.3. Антиоксидантный статус культуры ткани полисциас Polyscias filicifolia Bailey и Polyscias filicifolia LX-5 Bailey в условиях темппературного шока и воздействии низких положительных температур 76
3.2.4. Пролиферативная активность культивируемых клеток полисциас при высоко- и низко температурных воздействиях 82
Глава 4. Обсуждение результатов 83
Выводы 107
Список цитируемой литературы 108
