Введение
Глава 1. Диклофенак натрия – высокотоксичный экополлютант 14
1.1. Общая характеристика нестероидного противовоспалительного соединения диклофенака 14
1.2. Обнаружение диклофенака в экосистемах и живых организмах 17
1.3. Экотоксические эффекты диклофенака 24
1.3.1. Острая и хроническая токсичность диклофенака 24
1.3.2. Экотоксические эффекты диклофенака на беспозвоночных и позвоночных животных 25
1.3.3. Экотоксические эффекты диклофенака на растения 33
1.3.4. Экотоксические эффекты диклофенака на микроорганизмы 33
1.3.5. Экотоксические эффекты продуктов абиотической трансформации диклофенака 34
1.4. Биодеструкция диклофенака 35
1.4.1. Биодеструкция диклофенака с использованием грибов 36
1.4.2. Биодеструкция диклофенака с использованием бактерий 42
1.4.3. Ферменты, участвующие в трансформации диклофенака 45
1.5. Родококки – биоокислители фармполлютантов 47
Экспериментальная часть 60
Глава 2. Материалы и методы исследования 60
2.1. Рабочая коллекция 60
2.2. Химические реагенты 60
2.3. Условия культивирования 60
2.4. Kонтрольные эксперименты 69
2.5. Иммобилизация бактериальных клеток 70
2.6. Получение отдельных клеточных фракций родококков 73
2.7. Жизнеспособность бактериальных клеток 74
2.8. Минимальная подавляющая концентрация диклофенака 75
2.9. Микроскопические исследования 76
2.10. Гидрофобность клеток 77
2.11. Дзета-потенциал 77
2.12. Общие липиды 78
2.13. Дыхательная активность 78
2.14. Каталазная активность 79
2.15. Содержание глюкозы в среде культивирования 79
2.16. Содержание хлоридов в среде культивирования 80
2.17. Математическое моделирование процесса биодеструкции диклофенака 81
2.18. Количественный и качественный анализ диклофенака и его метаболитов 81
2.19. Фитотоксичность диклофенака и продуктов его биодеструкции 82
2.20. In silico анализ продуктов биодеструкции диклофенака 83
2.20.1. Биологическая активность продуктов биодеструкции диклофенака 83
2.20.2. Экотоксичность продуктов биодеструкции диклофенака 84
2.21. Статистическая обработка результатов 84
Глава 3. Исследование способности коллекционных штаммов родококков к деструкции диклофенака 85
3.1. Определение устойчивости родококков к диклофенаку 85
3.2. Биодеструкция диклофенака свободными клетками родококков 88
3.3. Биодеструкция диклофенака иммобилизованными родококками 93
3.4. Кинетическое моделирование процесса биодеструкции диклофенака 98
Глава 4. Ответные реакции родококков на токсическое воздействие диклофенака 107
4.1. Изменение морфометрических характеристик родококков под воздействием диклофенака 107
4.2. Влияние диклофенака на физико-химические характеристики родококков 112
4.3. Биодеструкция диклофенака с использованием отдельных клеточных фракций 117
Глава 5. Пути биодеструкции диклофенака. Токсичность продуктов его биодеструкции 120
5.1. Предполагаемые пути биодеструкции диклофенака 120
5.2. Фитотоксичность диклофенака и продуктов его биодеструкции 127
5.3. Экотоксичность продуктов биодеструкции диклофенака 129
5.4. Биологическая активность продуктов биодеструкции диклофенака 132
Заключение 134
Выводы 139
Список сокращений 140
Список литературы 142
