Введение
Глава I. Материалы и методы 43
I.Объекты исследования 43
2. Облучение животных и культуры клеток
Б.Дифференцировка и созревание клеток тимуса .... 15
В.Препаративные методы разделения клеток тимуса и биологические характеристики фракций 19
Г.Влияние радиации и глюкокортикоидных гормонов на лимфоциты тимуса 25
2.Краткие сведения о структурно-функциональной организации генома высших организмов 30
Глава II. Материалы и методы 43
I.Объекты исследования 43
2. Облучение животных и культуры клеток 43
З.Выделение и фракционирование тимоцитов 43
4.Определение количества тимоцитов находящихся в стадии метафазы 44
5.Оценка адгезивной способности тимоцитов 44
6.Анализ сулерспиральной структуры ядерной ДНК тимоцитов методом вискозиметрии 45
7.Включение %-тимидина и *%-уридина в фракциони рованные тимоциты 45
8.Выделение ядер 46
Э.Выделение РНК 47
а.Получение суммарной РНК 47
б.Экстракция РНК из ядер 47
в.Выделение цитоплазматической РНК 48
10.Очистка препаратов РНК от примесей ДНК 48
а.Обработка РНК ДНКазой I 48
б.Выоаливание высокомолекулярной РНК 49
II.Выделение поли(А)-содержащей РНК 49
а.Синтез поли(У)-сефарозы 49
б.Хроматография РНК на поли(У)-сефарозе 49
12.Определение концентрации РНК 50
ІЗ.Аналитическое фракционирование РНК 50
а.Электрофорез высокомолекулярных РНК 50
б. Регистрация результатов электрофореза РНК 51
в.Определение молекулярной массы РНК 51
14.Выделение ДНК 52
15.Фрагментация ДНК 53
16.Синтез гранулированного оксиаппатита 53
17.Выделение уникальной ДНК 54
18.Иодирование ДНК 55
19. Реассоциация уникальной ДНК 56
20.Гибридизация 1251-унДНК с избытком РНК 56
21.Получение 1251-мДНК и 1251-нДНК 57
22.Изучение кинетики реассоциации и гибридизации методом хроматографии на колонке с ГАВГ 57
23.Определение концентрации белка 58
24.Определение концентрации ДНК 58
25.Статистические методы 58
26.Реактивы, используемые в работе 58
Глава III. Результаты 59
I. Фракционирование тимоцитов в градиенте фиколл-пакаи их характеристика 59
а.Связь плавучей плотности клеток с их биологическими параметрами
б. Исследование влияния гидрокортизона и радиации на фракции тимоцитов 70
2.Влияние рентгеновского облучения на биосинтез и созревание РНК в субпопуляциях тимоцитов 80
3.Изучение генетической сложности ядерной и полиаденилированной цитоплазматической РНК фракций тимоцитов 91
Глава 17. Обсуждение результатов 105
В ы в о д ы 120
Форма внедрения 122
Литература 123
