Введение
Глава I. Обзор литературы. Перспективы использования молекулярного маркирования в селекции и семеноводстве сельскохозяйственных растений 22
1.1. Понятие молекулярно-генетического маркера 23
1.2. Типы молекулярных маркеров 26
1.2.1. ДНК - маркеры, основанные на ПЦР, как информативном методе изучения генетических источников 28
1.2.1.1. Микросателлитные молекулярные маркеры 33
1.3. Основные направления и преимущества использования молекулярных маркеров 35
1.4. Применение маркер-вспомогательной селекции (MAS) на рисе 40
1.5. Рис: особенности объекта и состояние исследований 44
1.6. Гены устойчивости к биотическим и абиотическим стрессорам и механизмы их действия 48
1.6.1. Гены устойчивости к фитопатогенам и механизмы их действия 49
1.6.1.1. Гены устойчивости к пирикуляриозу 53
1.6.2. Гены толерантности к длительному затоплению и механизмы их действия 60
1.6.3. Гены толерантности к низким положительным температурам в период проростання и всходов семян риса и механизмы их действия 63
1.7. Пирикуляриоз {Рyriсulаriа oryzае Са v.): особенности объекта и состояние исследований 64
1.8. Использование молекулярно-генетических маркеров для оценки гибридности семян Fi овощных культур 70
Глава II. Материалы и методы 73
2.1. Исходный материал 73
2.2. Выделение геномной ДНК 76
2.2.1. Выделение ДНК из растительного материала риса и овощных культур 76
2.2.2. Выделение геномной ДНК из мицелия гриба Pyricularia oryzae Cav 77
2.3. Условия проведения полимеразной цепной реакции (ПНР) 78
2.4. Электрофорез продуктов амплификации 81
2.5. Проведение гибридизации 82
2.6. Молекулярные маркеры, используемые в работе 84
2.6.1. SSR-маркеры в селекции риса на устойчивость к пирикуляриозу 84
2.6.2. SSR -маркеры в селекции риса на толерантность к длительному затоплению 87
2.6.3. SSR-маркеры на устойчивость к пониженным положительным температурам в фазу прорастания семян риса 89
2.6.4. SSR-маркеры, используемые при изучении биоразнообразия фитопатогенного гриба Pyricularia oryzae Cav 91
2.6.5. SSR-маркеры, используемые для оценки генетической чистоты гибридов Fi капусты белокочанной {Brassica oleracea L.) и перца сладкого {Capsicum аппиит L.) 96
2.7. Методика проведения фитопатологического тестирования на устойчивость к пирикуляриозу 100
2.8. Оценка селекционного материала по хозяйственно ценным признакам 101
2.9. Грунт-контроль, как метод определения уровня гибридности гибридов Fi овощных культур 103
2.10. Статистический анализ 104
2.11. Агротехнологический фон и условия произрастания сортов и генотипов риса и овощных культур, отобранных для молекулярно-генетического анализа 105
Глава III. Результаты и обсуждения 108
3.1. Селекция риса на устойчивость к биотическим и абиотическим факторам среды 108
3.1.1. Селекция риса на устойчивость к пирикуляриозу на основе метода ПЦР с использованием SSR-маркеров 109
3.1.2. Объединение генов устойчивости к пирикуляриозу и разработка мультипраймерных систем по их идентификации 122
3.1.3. Изучение селекционного материала с генами резистентности к пирикуляриозу по хозяйственно-ценным признакам и устойчивости к Pyricularia oryzae Cav 128
3.2. Молекулярное маркирование в селекции риса на устойчивость к пониженным положительным температурам в период прорастания семян 139
3.3. Введение гена устойчивости к длительному затоплению Subl в отечественную генплазму риса как фактор борьбы с сорными растениями 154
3.4. Генотипирование изолятов краснодарской популяции Pyriculariaoryzae Cav. методомПЦР 162
3.5. Определение генов (а)вирулентности высоковариобельного грибного фитопатогена Pyricularia oryzae Cav 189
3.6. Оценка сортовой чистоты гибридов г Brassica oleracea L. с использованием SSR-маркеров 196
3.7. Оценка сортовой чистоты гибридов г Сарsiсum аппиит L. на основе метода ПЦР с использованием SSR-маркеров 204
Заключение 213
Практические предложения селекции и семеноводству 217
Список литературы 218
Приложения 249
