Введение
1. Обзор литературы 11.
1.1. Антигены эхинококка и их характеристика 11.
1.2. Клеточная технология получения антигенов эхинококка 18.
1.3. Применение ELISA и dot-ELISA для диагностики гельминтозов 22.
2. Собственные исследования 38.
2.1. Материалы и методы 38.
2.1.1. Подготовка лабораторной посуды, инструментов и растворов для проведения культуральной работы 39.
2.1.2. Получение гельминтного материала для культивирования 40.
а) Приобретение цист E.granulosus от людей и
животных 40.
б) Заражение белых крыс протосколексами E.multilocularis, получение вторичных ларвоцист 40.
2.1.3. Приготовление первичной клеточной культуры E.granulosus и E.multilocularis и проверка ее жизнеспособности. Получение перевиваемой клеточной культуры 41.
2.1.4. Контроль клеточных метаболитов на стерильность, безвредность, определение содержания белка 42.
? 1.5. Проверка инвазивности клеточной культуры E.multilocularis 43.
2.1.6. Определение антигенной активности клеточных метаболитов E.granulosus и E.multilocularis 44.
2.1.7. Диагностическая эффективность метаболитов клеточных культур E.granulosus и E.multilocularis 45.
а) Сбор патологического материала от свиней 45.
б) Исследование сывороток крови свиней в реакции ELISA 46.
в) Исследование сывороток крови людей в реакции ELISA 47.
г) Исследование сывороток крови людей коммерческим тестом "Эхинококк IgG-стрип" 48.
2.1.8. Статистическая обработка результатов 48.
2.1.9. Разработка диагностической тест-системы на основе dot-ELISA 48.
2.1.10. Диагностическая эффективность dot-ELISA при цистном гидатидозе 50.
а) Исследование сывороток крови свиней 50.
б) Исследование сывороток крови людей 51.
2.2. Результаты исследований 52.
2.2.1. Анализ данных по культивированию протосколексов E.granulosus и вторичных ларвоцист E.multilocularis 52.
2.2.2. Характеристика и контроль метаболитов клеточных культур протосколексов E.granulosus и вторичных ларвоцист E.multilocularis 57.
2.2.3. Отбор и характеристика антигеноактивных метаболитов клеток протосколексов E.granulosus и вторичных ларвоцист E.multilocularis в иммуноферментной реакции 58.
2.2.4. Оценка диагностической эффективности антигенов -метаболитов клеточной культуры при цистном гидатидозе 60.
а) Диагностическая эффективность иммуноферментной реакции с антигенами клеточной культуры E.granulosus при цистном гидатидозе свиней 60.
б) Диагностическая эффективность иммуноферментной реакции с антигенами клеточной культуры E.multilocularis при цистном гидатидозе свиней 61.
в) Диагностическая эффективность антигенов клеточной культуры E.granulosus при цистном гидатидозе человека 62.
г) Диагностическая эффективность антигенов клеточной культуры E.multilocularis при цистном гидатидозе человека 68.
2.2.5. Исследование сывороток крови человека коммерческим тестом "Эхинококк IgG-стрип" 72.
2.2.6. Разработка диагностической тест-системы на основе dot-ELISA 73.
а) Диагностическая эффективность dot-ELISA с антигеном цистной жидкости при цистном гидатидозе человека 76.
б) Диагностическая эффективность dot-ELISA с антигеном клеточной культуры E.granulosus при цистном гидатидозе свиней 77 в) Диагностическая эффективность dot-ELISA с антигеном клеточной культуры E.multilocularis при цистном гидатидозе свиней 81.
г) Диагностическая эффективность dot-ELISA с антигеном клеточной культуры Е.granulosus при цистном гидатидозе человека 82.
д) Диагностическая эффективность dot-ELISA с антигеном клеточной культуры E.multilocularis при цистном гидатидозе человека 85.
2.2.7. Сравнение диагностической эффективности реакций ELISA, dot-ELISA и "Эхинококк IgG-стрип" при цистном гидатидозе 86.
2.2.8. Результаты заражения беспородных белых мышей клеточной культурой E.multilocularis 97.
3. Обсуждение полученных результатов 100.
4. Выводы 109.
5. Список использованной литературы 112.
Приложение
