Введение
Глава 1. Литературный обзор 9
1.1. Общие представления о механизме свертывания крови и тромбообразование на полимерной поверхности 9
1.2. Состав и структурные особенности адсорбционного белкового слоя на полимерной поверхности 17
1.3. Кинетика адсорбции плазменных белков на полимерной поверхности 37
1.3.1. Определение равновесной концентрации белка на поверхности . 41
1.3.2. Исследование влияния различных факторов на скорость адсорбции для качественного описания процесса 41
1.3.3. Моделирование адсорбционного процесса в системах полимер - белок 49
Глава 2. Дофузионно кинетическая модель адсорбции белков на гидрофобной полимерной поверхности 61
2.1. Кинетические уравнения образования белкового слоя на гидрофобной полимерной поверхности 61
2.1.1. Кинетика необратимой адсорбции 61
2.1.2. Обратимая адсорбция непосредственно на поверхность 63
2.1.3. Обратимая адсорбция в результате белок -белковых взаимодействий 63
2.2. Моделирование явлений переноса в жидкой фазе 66
2.3. Основные закономерности кинетжи адсоебщи, как следствия из диффузионно-кинетической модели 72
2.3.1. Влияние начальной концентрации белка в растворе на скорость адсорбционного процесса 73
2.3.2. Зависимость скорости адсорбции от коэффициента диффузии 76
2.3.3.Влияние толщины диффузионного слоя на скорость адсорбции плазменных белков 77
2.3.4. Влияние константы скорости конформационных превращений макромолекулы на скорость образования адсорбционного слоя 80
2.3.5. Зависимость кинетики накопления бедка на полимерной поверхности от констант скоростей адсорбции и десорбции обоих слоев 80
2.3.6. Моделирование процесса десорбции обратимого слоя 86
2.4. Модификации модели и перспективы их применения для изучения сложных адсорбционных процессов 93
2.4.1. Адсорбция на поверхности сополимера 94
2.4.2. Адсорбция из смеси белков 95
2.4.3. Моделирование кинетики конформационных превращений 98
Глава 3. Экспериментальная часть. метод определения параметров адсорбционных систем полимер - белок 102
3.1. Материалы и методы исследования 102
3.1.1. Биологические объекты 102
3.1.2. Полимерные материалы, использованные в работе 102
3.1.3. Буферные растворители 103
3.1.4. Рабочий диапазон концентраций белковых растворов 104
3.1.5. Приборы, используемые в работе 104
3.1.6. Приставки МНПВО 105
3.1.7. ЭПР - метка 105
3.1.8. Установка для проведения адсорбции 106
3.1.9. Калибровочные эксперименты 106
3.1.10. Полосы внутреннего стандарта в Ж -спектрах полимерных материалов 109
3.1.11. Синтез спин-меченого У - глобулина 109
3.1.12. Адсорбция спин-меченого jf - глобулина на полиэтилене 111
3.1.13. Получение ЭПР - спектров у - глобулина 111
3.1.14. Подготовка и ход кинетического эксперимента 111
3.1.15. Ошибка в определении концентрации белка на полимерной поверхности . 112
3.2. Обоснование экспериментальных исследований 113
3.2.1. Цель экспериментальной работы 113
3.2.2. Выбор биологических объектов 114
3.2.3. Выбор экспериментальных методов исследования 115
3.2.4. Порядок проведения эксперимента 116
3.3. Рассчет физико-химических параметров адсорбции 117
3.3.1. Определение предельной концентрации необратимого слоя и параметров обратимой адсорбции 117
3.3.2. Определение констант скоростей необратимого адсорбционного процесса 124
3.3.3. Проверка полученных значений параметров, общая характеристика полимер - белковой системы Т27
Глава 4. Сравнительное исследование адсорбции белков плазмы крови на полимерные поверхности 132
4.1. Физико-химические параметры адсорбции различных белков на поверхности гидрофобных полимеров 132
4.2. Зависимость кинетжи адсорбции от рН среды 144
4.3. Исследование структуры белка, адсорбированного на гидрофобной поверхности 146
4.4. Исследование влияния природы полимера на кйнетжу адсорбции белков плазмы крови 153
Выводы 167
Литература 169
Приложение 187
