Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 10
1.1. Эффект действия гравитационной разгрузки 10
1.2 Собственные механические свойства клеток 11
1.4 Механочувствительность и механосенсоры 16
1.4.1. Внеклеточный матрикс и мембранные белки 16
1.4.2. Механочувствительные ионные каналы 17
1.4.3. Подмембранный цитоскелет 18
1.4.4. Внутриклеточные структуры 20
1.4.5. Передача механического сигнала в ядро 22
1.4.6. Величина силы, приводящей к запуску клеточного ответа
1.5 Математическое моделирование в биологии 25
1.6 Реакция мышечных клеток на изменение внешних механических условий
1.6.1. Жёсткость мышечных клеток 29
1.6.2. Содержание белков 30
1.6.3. Клеточное дыхание 33
ГЛАВА 2. Математическая модель 36
2.1 Постановка задачи 36
2.2 Внешние воздействия 42
ГЛАВА 3. Материалы, методы и экспериментальные подходы 44
3.1. Объект исследования 44
3.2. Экспериментальные подходы
3.2.1. Антиортостатическое вывешивание грызунов 45
3.2.2. Инъекции фосфатидилхолинов 46
3.3. Методы исследования 46
3.3.1. Атомная силовая микроскопия 46
3.3.2. Метод полярографии для определения скорости клеточного дыхания 47
3.3.3. Денатурирующий электрофорез в полиакриламидном геле с последующим иммуноблоттингом на нитроцеллюлозной мембране 48
3.3.4. Полимеразная цепная реакция 49
3.3.5.Иммуногистохимическое определение альфа-актинина-4 51 3.3.6. Определение уровня кортикостерона в сыворотке крови 51
3.4. Экспериментальные группы и обработка результатов 51
ГЛАВА 4. Результаты 53
4.1. Эксперимент по исследованию динамики развития клеточного ответа на ранних этапах
антиортостатического вывешивания 53
4.1.1. Уровень стресса у крыс (Таблица 1) после кратковременной гравитационной разгрузки. 53
4.1.2. Поперечная жесткость 53
4.1.3. Клеточное дыхание 56
4.1.4. Относительное содержание белков 57
4.1.5. Содержание мРНК генов белков в цитоплазме
4.2. Численный эксперимент 63
4.3. Влияние инъекций смеси фосфатидилхолинов на механочувствиетльность мышечных волокон камбаловидной мышцы в условиях гравитационной разгрузки .
4.3.1. Поперечная жёсткость 65
4.3.2. Относительное содержание белков 66
4.3.3. Содержание мРНК генов белков в цитоплазме 68
4.3.4. Иммуногистохимическое окрашивание 70
ГЛАВА 5. Обсуждение 72
6. Выводы 92
7. Список литературы: 94
