ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ…………………………………………………………………………..…6
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………………………15
1.1. Патогенез и клиническая картина шизофрении………………………………...15
1.2. Нарушение работы основных нейротрансмиттерных систем в головном мозге
при шизофрении……………………………………………………………………….16
1.2.1. Нейромедиатор дофамин……………………………………………………….16
1.2.2. Дофаминергическая система мозга и дофаминовые рецепторы центральной
нервной системы……………………………………………………………………....17
1.2.3. Дофаминовая гипотеза шизофрении………………………………………..…22
1.2.4. Норадреналин и адренергическая система……………………………………24
1.2.5. Гистамин и гистаминергическая система……………………………………..27
1.3. Молекулярно-генетические основы развития шизофрении…………………....28
1.3.1. Генетические варианты, ассоциированные с развитием шизофрении………29
1.3.2. Экспрессионные маркеры, ассоциированные с развитием шизофрении………32
1.4. Нейроиммунные взаимодействия, опосредованные дофамином……………...36
1.5. Фармакологическая терапия психических расстройств. Антипсихотические
лекарственные средства………………………………………………………………37
1.5.1. Механизм действия, терапевтический эффект…………………………….….38
1.5.2. Молекулярно-генетические
факторы
в
прогнозе
эффективности
антипсихотической терапии………………………………………………………….40
1.5.3. Нежелательные
побочные
реакции,
индуцированные
приемом
антипсихотических препаратов………………………………………………………42
1.5.3.1. Экстрапирамидные симптомы……………………………………………….43
1.5.3.2. Метаболические нарушения…………………………………………………44
1.6. Разработка модельных объектов изучения шизофрении………………………46
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ...……………………...50
2.1. Характеристика обследуемых групп…………………………………………….50
2.2. Схема эксперимента………………………………………………………………53
2.3. Объект исследования……………………………………………………………..54
3
2.4. Методы исследования…………………………………………………………….55
2.4.1. Получение сыворотки и выделение фракции мононуклеарных клеток
периферической крови…………….………………………………………………….55
2.4.2. Выделение геномной ДНК из мононуклеарных клеток периферической
крови……………………………………………………………………………..…….55
2.4.3. Выделение тотальной РНК из мононуклеарных клеток периферической
крови…………………………………………………………………………...………56
2.4.4. Получение кДНК методом обратной транскрипции…………………………57
2.4.5. Количественное определение уровней мРНК генов DRD1, DRD2, DRD4,
DRD5, ADRa1B и HRH1 методом полимеразной цепной реакции в режиме
реального времени…………………………………………………………………….57
2.4.6. Определение генетического варианта rs1799732 (–141С Ins/Del) гена
DRD2…………………………………………………………………………………...60
2.4.7. Определения уровня белка рецепторов……………………………………….61
2.4.8. Культивирование мононуклеарных клеток в присутствии галоперидола или
оланзапина…………………………………………………………………...…….…..63
2.4.9. Определение уровня дофамина в сыворотке крови…………………………..63
2.5. Статистическая обработка данных……………………………………………....63
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ…………………………………………………………….65
3.1. Характеристики генов DRD1, DRD2, DRD4 и HRH1 в мононуклеарных клетках
периферической крови пациентов с расстройствами шизофренического спектра и у
лиц контрольной группы…………………………………………………………..….65
3.1.1. Уровни мРНК генов DRD1, DRD2, DRD4 и HRH1 в мононуклеарных клетках
периферической крови пациентов с расстройствами шизофренического спектра и у
лиц контрольной группы……………………………………………………………...65
3.1.2. Распределение генотипов генетического варианта rs1799732 (–141С Ins/Del)
гена DRD2 в группе пациентов с расстройствами шизофренического спектра и у
лиц контрольной группы……………………………………………………………...66
3.1.3. Влияние генетического варианта rs1799732 (–141С Ins/Del) на уровень мРНК
гена DRD2 в группе пациентов с расстройствами шизофренического спектра и у
лиц контрольной группы………………………………………..…………………….67
3.2. Уровни (мРНК, белок) рецепторов биогенных аминов в мононуклеарных
клетках периферической крови, а также концентрация дофамина в сыворотке крови
пациентов с расстройствами шизофренического спектра до начала лечения в
прогнозе
эффективности
4
галоперидолом
или
терапии
оланзапином…………………………………………………………………………...68
3.2.1. Анализ эффективности антипсихотической терапии………………..……….68
3.2.2. Уровни мРНК генов рецепторов биогенных аминов в ассоциации с
эффективностью терапии галоперидолом или оланзапином……………………….69
3.2.3. Уровни белка рецепторов биогенных аминов в ассоциации с эффективностью
терапии галоперидолом или оланзапином…………………………………………...71
3.2.4. Концентрация дофамина в сыворотке крови пациентов с расстройствами
шизофренического спектра в ассоциации с эффективностью терапии
галоперидолом или оланзапином…………………………………………………….73
3.2.5. Генетический вариант rs1799732 (–141С Ins/Del) гена DRD2 в ассоциации с
эффективностью терапии галоперидолом или оланзапином……………………….73
3.3. Уровни (мРНК, белок) рецепторов биогенных аминов в мононуклеарных
клетках периферической крови, а также концентрация дофамина в сыворотке крови
пациентов с расстройствами шизофренического спектра до начала лечения в
прогнозе безопасности терапии галоперидолом или оланзапином………………...74
3.3.1. Анализ безопасности антипсихотической терапии…………………………...74
3.3.2. Уровни (мРНК, белок) рецепторов биогенных аминов в мононуклеарных
клетках периферической крови, а также концентрация дофамина в сыворотке крови
пациентов
в
ассоциации
с
безопасностью
галоперидолом
или
оланзапином…………………………………………………………………………...75
3.3.3. Генетический вариант rs1799732 (–141С Ins/Del) гена DRD2 в ассоциации с
безопасностью терапии галоперидолом или оланзапином…………………………79
3.4. Динамика уровней (мРНК, белок) рецепторов биогенных аминов в
мононуклеарных клетках, а также концентрации дофамина в сыворотке крови
пациентов с расстройствами шизофренического спектра на фоне терапии
галоперидолом или оланзапином………………………………………………….....80
3.5. Корреляция уровней (мРНК, белок) рецепторов биогенных аминов в
мононуклеарных клетках пациентов с расстройствами шизофренического
спектра…………………………………………………………………………………86
3.6. Культивирование in vitro мононуклеарных клеток периферической крови
пациентов с расстройствами шизофренического спектра в присутствии
галоперидола или оланзапина………………………………………………………...91
3.6.1. Уровни мРНК генов DRD1, DRD2, DRD4, DRD5, ADRа1B и HRH1 в
мононуклеарных клетках пациентов с расстройствами шизофренического спектра
5
при культивировании in vitro в присутствии галоперидола или
оланзапина……………………………………………………………………………..91
3.6.2. Ассоциация уровней мРНК генов DRD1, DRD2, DRD4, DRD5, ADRa1B и
HRH1 в мононуклеарных клетках пациентов с расстройствами шизофренического
спектра при культивировании in vitro с эффективностью терапии галоперидолом
или оланзапином…………………………………………………………………..…..92
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ…………………………………………………………...99
ЗАКЛЮЧЕНИЕ………………………………………………………………………111
ВЫВОДЫ…………………………………………………………………… …….....113
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ…………..……….114
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ…………………………………………………………...116
