Введение
ГЛАВА 1. Микробные сообщества: структура, функционирование и взаимодействие с антропогенными поллютантами 8
1 Л.Функционирование почвенных микробных сообществ 8
1.1.1. Свойства и состав естественных микробных сообществ 8
1.1.2. Анализ современных методов изучения почвенных микробных сообществ 12
1.1.3. Реакция почвенных микробных сообществ на антропогенное загрязнение 16
1.2. Литнинсодержащие отходы целлюлозно-бумажной промышленности как антропогенный поллютант 25
1.2.1. Химический состав сточных вод ЦБП 25
1.2.2. Технические лигнины - отходы ЦБП 32
1.2.3. Влияние сточных вод ЦБП на живые организмы 33
1.3.Ферменты, участвующие в деградации лигноцеллюлозных субстратов 34
1.3.1. Ферменты, разрушающие целлюлозу 34
1.3.2. Ферменты, разрушающие лигнин 35
ГЛАВА 2. Объекты и методы исследований 47
2.1. Объекты исследований 47
2.2. Условия выделения микробных сообществ почвы 47
2.3. Питательные среды для выделения микроорганизмов и поддержания их в активном состоянии 48
2.4. Изучение морфофизиологических свойств штаммов 48
2.5. Качественные методы определения активности ферментов бактериальных штаммов 49
2.6. Условия и способы культивирования почвенных микробных сообществ 51
2.7. Определение концентрации редуцирующих веществ 52
2.8. Определение концентрации белка 52
2.9. Методы исследования химического состава л и гнинсо держащих субстратов до и после воздействия на них микробных сообществ и отдельных штаммов 53
2.9.1. Определение содержания фенолов 53
2.9.2. Спектральные методы анализа 54
2.9.2.1. УФ-спектроскопия 54
2.9.2.2. ИК-спектроскопия 54
2.9.2.3. Спектроскопия ЯМР 54
2.10. Методы определения активностей ферментов, участвующих в разложении лигноцеллюлозных субстратов 55
2.10.1 Определение активности целлюлазы 55
2.10.2. Определение активности лигнолитических ферментов 55
2.11. Статистическая обработка полученных результатов 56
ГЛАВА 3. Микробные сообщества почв, загрязненных сточными водами целлюлозно-бумажной промышленности: структура, свойства и взаимодействие с лигнинными веществами 57
3.1. Байкальские почвенные микробные сообщества 57
3.2. Влияние сточных вод БЦБК на рост и свойства микробных сообществ 63
3.3. Развитие микробных сообществ на средах с ячменной лузгой и глюкозой 69
3.4. Рост микробных сообществ на средах с лигнинами 70
3.4.1. Изменение структуры микробных сообществ 71
3.4.2. Воздействие микробных сообществ на лигнин 71
3.4.2.1. Химический состав лигнинсодержащих субстратов..72
3.4.2.2. Утилизация растворимой и нерастворимой фракций лигнина микросообществами 73
3.4.2.3. Количественная спектроскопия ЯМР растворимой фракции взорванного лигнина, 76
3.4.2.4. Исследование воздействия концентрации лигнина на микробное сообщество СБ 83
3.4.2.5. Развитие байкальских почвенных микросообществ на среде с лигнином, обработанным электрическим разрядом 85
3.4.2.6. Внеклеточные ферменты микробных сообществ при
росте на средах с лигнинами ...87
3.5. Воздействие отдельных компонентов микросообщества СБ на лигнинсодержащие субстраты 88
3.5.1. Изменения видового и количественного состава микробного сообщества , 89
3.5.2. Воздействие компонентов микробного сообщества на фенольные вещества культуральноЙ жидкости 90
3.5.3. Воздействие отдельных компонентов микробного сообщества на растворимые лигнинные вещества 92
3.5.4. Активность ферментов компонентов микробного сообщества СБ при культивировании на среде с ЛС-1 94
3.5.5. Влияние компонентов микросообщества на уровень кислотности среды 96
3.6. Взаимодействие компонентов СБ при культивировании на среде с ЛС-1 96
3.7. Обсуждение результатов 101
ВЫВОДЫ 107
Список литературы ,. 108
Приложения 120
