Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1. Фотосинтетического метаболизм. 13
1.1.1. Типы фотосинтетического метаболизма 13
1.1.1.1. Фотосинтез у с3-растений 13
1.1.1.2. Фотосинтез у сз-растений 14
1.1.1.3. Фотосинтез по типу толстянковых, сам - метаболизм 17
1.1.1.4. Фотосинтез у растений с переходными типами метаболизма 18
1.2. Фотодыхание у растений с с3- и с4- типом метаболизма 19
1.2.1. Гликолатный путь характерный сз-растениям 22
1.2.2. Гликолатный путь характерный с-растениям 25
1.3. Связь восстановительного пентозофосфатного пути с фотодыханием 26
1.4. Гликолатоксидаза 27
1.4.1. Ферментативная реакция и ее механизм 27
1.4.2. Распространение гликолатоксидазы 28
1.4.3. Физико-химические и кинетические свойства гликолатоксидазы 31
1.4.4 Выделение и очистка гликолатоксидазы 35
1.4.5 Характеристика структуры гена и пространственной организации белка гликолатоксидазы 37
1.5. Энергетика процесса фотодыхания 41
1.5.1. Роль фотодыхания в метаболизме растений 43
1.5.2. Роль пероксисомального метаболизма у с4-растений. 50
Глава 2. Материалы и методы исследования. 58
2.1. Объекты исследования 58
2.2. Методы исследования 58
2.2.1. Выделение ферментов из растительных объектов 58
2.2.2. Разделение клеток обкладки и мезофилла с4- растений 59
2.2.3. Определение перекрестного загрязнения тканей 59
2.2.4. Методы определения активности ферментов 60
2.2.4.1. Определение активности го 60
2.2.4.2. Определение активности феп карбоксилазы 60
2.2.4.3. Определение активности надф-зависимой глицеральдегидфосфатдегидрогеназы 60
2.2.5.методы очистки изучаемого фермента 61
2.2.5.1. Очистка го из целых листьев 61
2.2.5.2. Очистка го из клеток обкладки и мезофилла с4 - растений 63
2.2.6. Исследование кинетических характеристик и регуляции ферментов 64
2.2.7. Определение количества белка 64
2.2.8. Определение содержания хлорофилла 64
2.2.9. Определение молекулярной массы нативного фермента 65
2.2.10. Электрофоретические исследования. 65
2.2.11. Определение массы субъединиц фермента 66
2.2.12. Статистическая обработка данных 67
Глава 3. Особенности тканевой специфичности и физико- химических свойств гликолатоксидазы у с4 - растениий 69
3.1. Распространение го в растениях с различным типом метаболизма 69
3.2. Распределение активности го между тканями листа в растениях с, -группы 70
3.3. Определение величин перекрестного загрязнения между изучаемыми тканями 72
3.4.Очистка го из с3 - и с4 - растений 74
3.4.1. Очистка го из с3-растения пшеницы 74
3.4.2. Очистка го из с3 - с4- растения табака 76
3.4.3. Очистка го из целых листьев, мезофилла и клеток обкладки проводящих пучков растений с4 - группы... 80
3.5. Электрофоретические исследования 93
3.6. Изучение каталитических свойств го из листьев пшеницы и клеток обкладки и мезофилла амаранта, сорго, табака, кукурузы 98
3.7. Определение температурного оптимума для го из листьев с4-растений 104
3.8. Изучение влияния метаболитов на активность го 106
3.8.1. Изучение влияния цитрата, изоцитрата сукцината и малата на активность го из с3 - и с4 - растений 106
3.8.2. Изучение влияния глицина и серина на активность го из сз-и с4-растений 117
3.8.3. Изучение влияния ионов кальция, магния, марганца на активность го из с4-растений 123
3.9. Изменение динамики активности гликолатоксидазы в процессе зеленения этиолированных проростков с4- растений 129
Заключение 132
Выводы. 135
Источники литературы. 137
