Введение
Глава 1. Современник представления о механизме реакций ферментативного декарбокжлирования пяроштоградной кислоты
1.1. Общая характеристика тиаминзависимых реакций 12
1.2. Механизм реакции декарбоксилирования пирови-ноградной кислоты: классическая схема 14
1.3. Физико-химические характеристики тиамина 19
1.4. Взаимодействие тиаминпирофоефата с ионами металлов 22
1.5. Роль свободнорадикаяьных реакций и процессов переноса электрона в механизме тиаминового катализа 26
Глава 2. Шзико-химичвше характеристики пирошноградной кислоты - субстрата пируватдекарбоксилазы
2.1. Структура и спектральные свойства пировиноградной кислоты в органических растворителях 29
2.2. Структура пировиноградной кислоты в водных растворах. Обратимая гидратация пировиноградной кислоты 31
2.3. Фотохимическое декарбоксилирование пировиноградной кислоты 33
Глава 3. Шзико-химические характеристики пируватдекарбоксилазы
3.1. Общие свойства и структура пируватдекарбоксилазы 37
3.2. Регуляция каталитической активности пируватде-карбоксилазы 39
3.3. Взаимодействие пируватдекарбоксилазы с кофак-торами, субстратом и продуктом реакции - ацетальдегидом 41
Глава 4 Матешалы исследования, методы и техника эксперимента
4.1. Объекты исследования 47
4.2. Выделение пируватдекарбоксилазы из пивных дрожжей 48
4.3. Приборы и техника эксперимента 51
4.4. Химическая модификация белков 53
4.5. Фотохимические превращения пирошноградной кислоты 55
Глава 5. Шзико-химйчшкйе свойства пйровшогрдпдой кислоты
5.1. Спектрально-люминесцентные свойства пирошноградной кислоты в органических растворителях и их связь со структурой молекулы 58
5.2. Состояние и люминесцентные свойства пирошноградной кислоты в водных растворах 67
Глава 6. Декарбоксилирование пирошноградной кислоты
6.1. Механизм фотодекарбоксилирования пирошноградной кислоты в водных растворах 77
6.2. Влияние тиамина на фотодекарбоксилирование пирошноградной кислоты 86
6.3. Окислительное декарбоксилирование пирошноградной кислоты в фотохимической и ферментативной реакциях 89
Глава 7. Некоторые шзико-химические характеристики пируватдекарбоксилазы
7.1. Флуоресценция пируватдекарбоксилазы. рН - индуцируемые конформационные перестройки молекулы фермента 97
7.2. Взаимодействие пируватдекарбоксилазы с субстратом и ионами металлов 102
7.3. Взаимодействие тиаминпирофосфата с ионами металлов 109
7.4. Некоторые регуляторные свойства пируватдекарбоксилазы 120
7.5. Влияние температуры на скорость реакции, катализируемой пируватдекарбоксилазой. Роль внутриглобулярной подвижности 128
Глава 8. Взаимодействие пируватдекарбоксилазы с ацетальдегидом
8.1. Необратимое ингибирование пируватдекарбоксилазы продуктом реакции - ацетальдегидом 132
8.2. Механизм взаимодействия ацетальдегида с белком 135
8.3. Изучение взаимодействия карбонилсодержащих соединений с белком методом флуоресцентной метки 139
Выводы 153
Литература 155
