Введение
ГЛАВА 1. Литературный обзор 10
1.1. Основные принципы и методы фотодинамической терапии 10
1.1.1. История развития метода фотодинамической терапии, краткая характеристика традиционных фотосенсибилизаторов 10
1.1.2. Физико-химические основы ФДТ 14
1.1.3. Биологические механизмы действия ФДТ 19
1.1.4. Требования к фотосенсибилизаторам и их классификация 21
1.2. Фуллерены и их производные 26
1.2.1. Химико-физические свойства фуллеренов 27
1.2.2. Водорастворимые производные фуллерена 29
1.2.3. Токсичность и биологическая активность фуллерена 31
1.2.4. Фуллерены как потенциальные фотосенсибилизаторы для ФДТ 35
1.3. Гибридные диады фуллерен-краситель в ФДТ 42
1.3.1. Физические принципы создания диад фуллерен-краситель для ФДТ 42
1.3.2. Фотофизические характеристики диад фуллерен-краситель 47
1.3.3. Триады и тетрады на основе фуллеренов и красителей 52
1.3.4. Биологическая активность ковалентных диад фуллерен-краситель 55
ГЛАВА 2. Материалы и методы 63
2.1. Материалы 63
2.1.1. Приборы и аппаратура 65
2.2. МЕТОДЫ 66
2.2.1. Метод оценки фотохимической активности 66
2.2.2. Приготовление суспензии лецитиновых липосом 67
2.2.3. Определение коэффициента распределения октанол-вода 68
2.2.4. Оценка фотодинамического повреждения ДНК 68
2.2.5. Оценка фотодинамической активности на культуре опухолевых клеток 70
2.3. Статистическая обработка результатов 71
ГЛАВА 3. Фотохимические и фотофизические свойства гибридных структур ппф краситель в водном растворе
3.1. Комплекс «ппф+эозин» 72
3.1.1. Фотохимичеcкая активность комплекса «ППФ+эозин» 72
3.1.2. Исследование спектров стационарной флуоресценции и кинетики затухания флуоресценции эозина в присутствии ППФ- 1 76
3.1.3. Исследование спектров поглощения эозина в присутствии ППФ-1 и НСТ 81
3.1.4. Анализ механизмов тушения флуоресценции эозина соединением ППФ-1 в составе комплекса 84
3.1.5. Исследование влияния НСТ, НАДН, ЭДТА на интенсивность флуоресценции эозина Y 87
3.1.6. Влияние ППФ-1 на фотостабильность эозина в составе нековалентного комплекса
3.2. Комплексы «ппф+флуоресцеин» и «ппф+эритрозин» 92
3.3. Комплекс ппф-1 с коммерческим препаратом фотосенс 95
3.4. Гибридные структуры на основе ковалентных конъюгатов производных фуллерена с красителями флуоресцеин и рубоксил 101
ГЛАВА 4. Фотохимическая активность гибридных структур ппф-краситель в структуре липосом 111
4.1. Определение коэффициента распределения октанол-вода для гибридных структур ппф-краситель 111
4.2. Фотохимическая активность нековалентных комплексов «ппф+краситель» в структуре липосом 114
4.3. Изменение спектров поглощения красителей в присутствии ппф-1 в структуре липосом 120
4.4. Исследование спектров стационарной флуоресценции красителей в присутствии ппф-1 в структуре липосом 122
4.5. Анализ механизмов фотохимической активности гибридных систем ппф-краситель в структуре липосом 125
ГЛАВА 5. Фотодинамическое действие конъюгатов ппф(к)-флуоресцеин и ппф рубоксил в биологических модельных системах 131
5.1. Фотодинамическое действие ппф на плазмидную ДНК 131
5.1.1. Фотодинамическое действие диады ППФ-Рубоксил на плазмидную ДНК 133
5.1.2. Фотодинамическое действие диады ППФ(К)-флуоресцеин на плазмидную ДНК 135
5.2. Фотодинамическое действие конъюгата ппф(к)-флуоресцеин на клетки hela 137
Заключение 140
Выводы 144
Литература 145
