Введение
Обзор литературы 10
2.1 Общие принципы строения и функции печени 10
2.2 Морфо-функциональные изменения в печени при хронических гепатитах и циррозе различной этиологии 14
2.3 Гепатотоксическое действие четыреххлористого углерода (СС14) и этанола 16
2.4 Регенерация печени. Роль клеточного дыхания 19
2.5 Дыхательная цепь митохондрий. Структура и функция 20
2.6 Состояние дыхательной цени при патологии печени 35
2.7 Возможные места образования супероксидного аниона в дыхательной цепи митохондрий 40
2.8 Антиоксидантная система митохондрий гепатоцитов 41
Материалы и методы 45
3.1 Экспериментальные животные и моделирование токсического гепатита 45
3.2 Приготовление гистологических срезов печени 45
3.3 Получение изолированных гепатоцитов и их культивирование 45
3.4 Окраска изолированных гепатоцитов родамином 123 46
3.5 Выделение митохондрий из гепатоцитов 47
3.6 Выделение субмитохондриальных частиц из митохондрий 47
3.7 Оценка функционального состояния дыхательной цепи митохондрий 48
3.7.1 Применение полярографического метода измерения скорости потребления кислорода изолированными гепатоцитами и митохондриями 48
3.7.2 Параметры оценки функционального состояния дыхательной цепи митохондрий 50
3.7.3 Определение активности цитохром с оксидазы 51
3.7.4 Определение адениловых нуклеотидов 51
3.8 Измерение скорости продукции супероксидного аниона 52
3.9 Определение параметров перекисного окисления липидов в печени 53
3.9.1 Измерение диеновых конъюгатов 53
3.9.2 Измерение Шиффовых оснований 53
3.10 Определение уровня триглицеридов 54
3.11 Измерение сухой массы изолированных гепатоцитов 54
3.12 Оценка антиоксидантного статуса митохондрий 55
3.12.1 Определение активности митохондриальной супероксиддисмутазы 55
3.12.2 Определение активности митохондриальной глутатионпероксидазы 55
3.12.3 Определение окисленного и восстановленного митохондриального глутатиона 56
3.13 Статистическая обработка полученных данных 56
4. Результаты 57
4.1 Экспериментальный токсический гепатит 57
4.1.1 Гистологическая характеристика печени 57
4.1.2 Морфология изолированных гепатоцитов 57
4.1.3 Морфология митохондрий, окрашенных родамином 123 61
4.1.4 Уровень триглицеридов в печени 63
4.1.5 Сухая масса изолированных гепатоцитов 63
4.2 Активность процессов перекисного окисления липидов в печени крыс при экспериментальном токсическом гепатите 64
4.3 Отработка условий измерения скорости дыхания изолированных гепатоцитов с помощью полярографического метода 65
4.4 Оценка скорости дыхания изолированных гепатоцитов при экспериментальном токсическом гепатите 69
4.5 Оценка скорости дыхания изолированных митохондрий при экспериментальном токсическом гепатите 70
4.6 Активность цитохром с оксидазы 74
4.7 Продукция супероксидного аниона субмитохондриальными частицами гепатоцитов при экспериментальном токсическом гепатите 75
4.8 Анализ антиоксидантной системы митохондрий при экспериментальном токсическом гепатите. Активности супероксиддисмутазы и глутатион-пероксидазы, концентрации окисленного и восстановленного глутатиона 77
4.9 Содержание адениловых нуклеотидов в печени (АМФ, АДФ, АТФ) 79
Обсуждение 80
Выводы 93
Список литературы
