Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 13
1.1. Гемолизины бактерий 13
1.2. Роль ионов железа в продукции гемолизинов 15
1.3. Гемолитическая активность холерных вибрионов 23
1.4. Влияние условий культивирования на продукцию гемолизина холерных вибрионов 26
1.5. Генетическое детерминирование синтеза гемолизина 27
1.6. Гемолизин холерных вибрионов. Получение и свойства 29
ГЛАВА 2. Материалы и методы 35
2.1. Бактериальные штаммы 35
2.2. Питательные среды 43
2.3. Методы изучения гемолитической активности 44
2.4. Оценка биологической активности супернатантов холерных вибрионов 46
2.4.1. Использование монослойных перевиваемых клеточных культур 46
2.4.2. Использование модели кроликов-сосунков 47
2.4.3. Использование кожной пробы Крейга 48
2.5 Получение и характеристика гемолизина холерных вибрионов 48
2.5.1. Получение гемолизина холерных вибрионов 48
2.5.2. Электрофорез в полиакриламидном геле 49
2.5.3 Количественное определение белка 49
2.6. Получение иммунных сывороток к препаратам гемолизина холерных вибрионов 50
2.7. Изучение препаратов гемолизина в иммуноблотинге 50
2.8. Диффузная иммунно-преципитация по Ouchterlony 51
2.9. Статистическая обработка 51
Собственные исследования.
ГЛАВА 3. Характеристика гемолитической активности холерных вибрионов различных серогрупп и токсигенности 52
3.1. Изучение гемолитической активности токсигенных и нетоксигенных штаммов холерных вибрионов eltor и 0139 серогруппы 55
3.2. Изучение влияния условий культивирования на интенсивность гемолитической активности токсигенных и нетоксигенных штаммов холерных вибрионов eltor и 0139 серогруппы 64
ГЛАВА 4. Характеристика биологической активности тосигенных и нетоксигенных штаммов холерных вибрионов, культивируемых на различных питательных средах 76
4.1. Тестирование супернатантов токсигенных и нетоксигенных штаммов холерных вибрионов, культивируемых на различных питательных средах, на модели перевиваемых клеточных культур 76
4.2. Влияние среды культивирования на экспрессию биологически активных факторов холерных вибрионов eltor и 0139 серогруппы на модели кишечника кроликов-сосунков 80
ГЛАВА 5. Получение и сравнительная характеристика гемолизина токсигенных и нетоксигенных штаммов холерных вибрионов различных серогрупп 86
5.1. Получение и характеристика препаратов гемолизина холерных вибрионов эльтор и 0139 серогруппы, выращенных в условиях дефицита железа 86
5.2. Изучение спектра гемолитической активности препаратов гемолизина токсигенных и нетоксигенных штаммов холерных вибрионов различных серогрупп 97
5.3. Получение сывороток и изучение серологической специфичности препаратов гемолизина токсигенных и нетоксигенных штаммов холерных вибрионов 99
Заключение 105
Выводы 111
Литература 113
