Введение
Глава 1. Обзор литературы 11
1.1. Флавоноидные пигменты в зерне пшеницы: локализация, химический состав, генетический контроль и практическое значение 12
1.1.1. Локализация и химический состав флавоноидных пигментов в зерновке пшеницы 13
1.1.2. Практическое значение флавоноидных пигментов, содержащихся в зерновке пшеницы и других злаковых растений 16
1.1.3. Генетический контроль синтеза флавоноидных пигментов в зерновке пшеницы 18
1.2. Комплекс ферментов и генов, вовлеченных в биосинтез флавоноидных пигментов у растений 21
1.3. Генетические модели для исследования локализации и функциональной организации генов пшеницы и методы их создания 36
Заключение к Главе 1 42
Глава 2. Материалы и методы 43
2.1. Растительный материал 43
2.2. Методы 46
2.2.1. Фенотипирование растений 46
2.2.2. Генотипирование 47
2.2.2.1. Микросателлитные маркеры 47
2.2.2.2. Выделение ДНК 48
2.2.2.3. Полимеразная цепная реакция 49
2.2.2.4. Электрофоретический анализ ДНК 49
2.2.3. Анализ транскрипции 50
2.2.3.1. Выделение РНК, обратная транскрипция 50
2.2.3.2. Количественная ОТ-ПЦР и анализ продуктов реакции 50
2.2.4.Выделение и анализ содержания антоцианов 52
2.2.5. Методы статистического и компьютерного анализа 52
Глава. 3. Результаты 53
3.1. Маркер-контролируемое получение изогенных линий пшеницы с различными комбинациями аллелей в локусах Pp-AJ, Pp-Dl и РрЗ 53
3.1.1. Схема скрещивания (гибридизация и фенотипирование) 53
3.1.2. Маркер контролируемый отбор полученных растений пшеницы 54
3.1.2.1. Оценка возможности использования маркера Re 55
3.1.2.2. Отбор растений с помощью фенотипических маркеров 56
3.1.2.3. Отбор изогенных линий с помощью молекулярных маркеров 58
3.2. Анализирующие скрещивания 60
3.3. Изучение относительного содержания антоцианов в цельном зерне изогенных линий пшеницы 63
3.4. Изучение функциональной роли отдельных генов Рр в регуляции транскрипции генов биосинтеза антоцианов в перикарпе зерна пшеницы
3.4.1. Экспрессия генов Chi и F3h в перикарпе изогенных линий 64
3.4.2. Использование полученных линий для изучения взаимодействия между генами Рр 67
Заключение к Главе 3 69
Глава 4. Обсуждение 71
4.1. Маркер-контролируемое получение растений с заданным генотипом 71
4.2. Гомеологичные копии генов Рр 73
4.3. Новые изогенные линии как удобная генетическая модель 76
4.4. Особенности регуляции биосинтеза антоцианов в перикарпе 79
Заключение 84
Выводы 88
Список литературы
