Введение
1. Обзор литературы 9
1.1. Характеристика возбудителя некробактериоза 9
1.1.1. Морфология Fusobacterium necrophorum 9
1.1.2. Культуральные и биохимические свойства 12
1.2. Диагностика некробактериоза 14
1.3. Полимеразная цепная реакция. 15
1.3.1. Выделение ДНК 15
1.3.2. Подбор праймеров 17
1.3.3. Постановка полимеразной цепной реакции 18
1.4. Гнездовая ПЦР (nested PCR) 21
1.5. Исследование геномного полиморфизма BRAPD-ПЦР 22
1.6. Заключение по обзору литературы 30
2. Собственные исследования 33
2.1. Материалы и методы исследования 33
2.2. Результаты исследований 37
2.2.1. Изучение геномного полиморфизма F. necrophorum subsp. necrophorum с помощью RAPD-PCR-анализа 37
2.2.1.1. Усовершенствованние методики выделения ДНК из культур F. necrophorum и биообразцов с помощью цетриламмония бромид (СТАВ) 37
2.2.1.2. Проверка чистоты выделенной ДНК 39
2.2.1.3. Выбор произвольных праймеров и проведение RAPD-PCR 39
2.2.2. Исследование патогенности культур Fusobacterium necrophorum на лабораторных животных 52
2.2.3. Генетическая характеристика культур Fusobacterium necrophorum subsp. necrophorum
2.2.4. Оптимизация гнездовой ПНР
2.2.5. Разработка совмещенной гнездовой ПНР
3. Обсуждение результатов исследований
4. Выводы
5. Практические предложения
6. Литература
7. Приложение
