Введение
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Методы амплификации и высокочувствительной детекции специфичных фрагментов ДНК и РНК 10
1.2. Полимеразная цепная реакция в реальном времени - ПЦР-РВ . 16
1.3. Лигазная цепная реакция - ЛЦР 37
1.4. Амплификация смещением цепи - Strand Displacement Amplification (SDA) 45
1.5. Амплификация по типу катящегося кольца или рамификация 48
1.6. Самоподдерживающая репликация 5.0
1.7. Технология циклирующей пробы 52
1.8. Гибридизационная цепная реакция - ГЦР 54
Глава 2. Объекты и методы исследований
2.1. Объекты исследований 58
2.2. Выделение и очистка нуклеиновых кислот 58
2.3. Получение кДНК 60
2.4. Гибридизационная цепная реакция в реальном времени 60
2.5. Полимеразная цепная реакция 61
2.6. Полимеразная цепная реакция в реальном времени 61
2.7. Транскрипционная цепная реакция в реальном времени 62
2.8. Рамификация в реальном времени 62
2.9. Проведение амплификации по типу катящегося кольца с дезоксирибозимным расщеплением химерной пробы в реальном времени 63
2.10. Электрофоретический анализ ампликонов и исходных молекул нуклеиновых кислот 64
2.11. Компьютерный анализ нуклеотидных последовательностей . 65
2.12. Использованные в работе обычные и модифицированные олигонуклеотиды 66
2.13. Основные реактивы, использованные в работе 69
2.14. Составы использованных стандартных растворов 70
Глава 3. Результаты и обсуждение
3.1. Гибридизационная цепная реакция в реальном времени 71
3.2. Полимеразная цепная реакция в реальном времени 95
3.3. Транскрипционная цепная реакция в реальном времени 107
3.4. Рамификация в реальном времени 111
3.5. Амплификация по типу катящегося кольца с дезоксирибозимным расщеплением химерной пробы 115
3.6. Применимость реакций амплификации и высокочувствительной детекции в реальном времени для фундаментальных исследований и диагностических целей 122
Заключение 134
Выводы 137
Литература 139
